在建立基因敲除(KO)細胞株后,我們必須對細胞株進行充分的驗證,以確保細胞株構建成功。除了采用常規(guī)的PCR、測序等方法外,蛋白水平的Western blot(WB)驗證也尤為重要。你有沒有經歷過,WB鑒定蛋白與PCR測序結果不一致?WB結果中無信號或顯示信號弱?
在WB驗證中,偶爾會出現測序鑒定為KO純合子但WB檢測卻顯示有蛋白殘留。出現這種情況的原因眾多,其中由外顯子的可變剪切引起的蛋白殘留是最為復雜的,其影響因素包括細胞系的類型,靶基因和細胞的培養(yǎng)環(huán)境等。總的來說,蛋白殘留跟gRNA的設計、基因(或mRNA)的可變剪切、WB抗體的選擇等因素都密切相關。
不過無需擔心!針對這些疑難雜癥,11月9日(周四)晚7點,賽業(yè)生物細胞基因編輯生產經理范麗莉將帶來「基因敲除細胞蛋白水平驗證的挑戰(zhàn)和解決方案」線上課程,從基因敲除細胞系構建、細胞株驗證等多個應用場景展開,為大家詳細講解基因敲除細胞系鑒定方法與技術特點,以及優(yōu)化gRNA設計、提高編輯效率的實驗技巧,通過具體操作案例分析實現體外疾病模型構建的創(chuàng)新策略。
賽業(yè)生物自主開發(fā)的細胞基因編輯系統(tǒng)Smart-CRISPR™,是基于人工智能技術所建立的綜合算法,通過最優(yōu)的gRNA設計,結合抗體分析,及階段性WB測試等策略,為您提供科學的解決方案,讓您不再為KO細胞蛋白殘留問題而發(fā)愁。“碼”上報名,相約云端,參與課程將有機會獲得藍牙耳機、數據線、小鼠公仔等驚喜好禮!
1.基因敲除細胞系相關研究及應用場景
2.基因敲除細胞系構建策略及課題解決方案
3.基因敲除細胞系鑒定方法與技術特點
4.基因敲除細胞系的使用及其常見問題解析
02 講師簡介
華南農業(yè)大學畢業(yè),從事細胞基因編輯相關研究超7年,具有多年分子生物學和細胞生物學相關實驗技術的研究經驗。
03 課程指南
針對基因敲除細胞株存在的構建技術難點,以及iPSC細胞單克隆制備復雜等問題,賽業(yè)生物逐一給出了應對措施及解決方案,并向大家提供具備參考價值的案例展示。如您想要了解相關內容,或是查詢我們已有的客戶文獻發(fā)表,可掃碼下載這份《體外細胞模型解決方案》獲取更多信息。