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奧盛推出高通量測序NGS助手Feyond-F100熒光酶標儀

瀏覽次數:2919 發布日期:2024-3-27  來源:本站 本站原創,轉載請注明出處
文庫的質量對于高通量測序(NGS)產出的數據質量至關重要,低估或高估文庫質量都會嚴重影響測序的效果。目前,最常用的定量試劑,是以Picogreen為主要成分的熒光染料,當其與DNA雙鏈結合后,才能發出熒光,且所產生的熒光在一定范圍內與DNA濃度呈正比,從而起到對DNA樣本的精準定量。
 
與這類試劑搭配最常見的儀器,應是熒光計和熒光酶標儀。常見的熒光計有Thermo的Qubit4和Qubit Flex,還有奧盛自有產品Fluo-200和Fluo-800,但熒光計的通量較少,最多只能做到8通道,若要同時進行8通道的樣品檢測,還需同時進行8通道的標品校準,非常浪費試劑。而選用熒光酶標儀作為檢測工具時,雖然檢測通量有所增大,但面臨著標準曲線建立的問題,由于熒光染料受環境的影響較大,因此在每次進行樣品檢測時,都需要重新建立一條標準曲線,若標曲線性不夠理想,還需重新配制標曲,增加實驗負擔。

 
奧盛3月份推出的Feyond-F100熒光酶標儀不僅可進行常規的細胞活性、GFP、RFP、ORAC、Ca2+流分析等熒光實驗,新增的定量檢測功能集熒光計的便利與酶標儀的高通量于一身,無需建立標準曲線,僅需校準標品點,即可實現96個樣品的精確定量,最低檢出限達0.1ng/uL(10uL樣本量);該款熒光酶標儀3月22日已上市。



 
特色功能

除常規熒光檢測外,新增定量模式
 
 圖1 Feyond-F100主界面圖
 
僅需布局兩個標品點,即可完成曲線校準
 
 圖2 標準品校準界面
 
內置標曲,調用即可,也可自行建立曲線保存

 
 圖3 標準曲線界面
 
僅需輸入樣品體積,檢測結果一目了然

圖4 結果顯示界面
 
 
性能優異
 
標品性能驗證

將10ng/uL標品梯度稀釋成8、6、4、2、1、0.4、0.2ng/uL。樣本量為1uL或10uL時,Feyond-F100與Q的偏差均在10%以內。
 
表1 標準品檢測結果
 
體積 樣品類型 Q定量 Feyond-F100 差值 偏差
10 標品 0.189 0.1941 -0.0051 -2.7%
10 標品 0.378 0.3854 -0.0074 -2.0%
10 標品 0.982 0.9739 0.0081 0.8%
10 標品 1.93 1.9675 -0.0375 -1.9%
10 標品 4 4.0883 -0.0883 -2.2%
10 標品 5.94 6.0796 -0.1396 -2.4%
10 標品 7.78 7.8077 -0.0277 -0.4%
10 標品 10.2 10.0803 0.1197 1.2%
1 標品 1.03 1.095 -0.065 -6.3%
1 標品 1.92 1.997 -0.077 -4.0%
1 標品 4.1 4.12 -0.02 -0.5%
1 標品 6.18 6.043 0.137 2.2%
1 標品 8.14 7.895 0.245 3.0%
1 標品 10.5 10.059 0.441 4.2%

文庫及核酸定量
 
在測試文庫樣本及cfDNA樣本時,Feyond-F100與Q的偏差也可在10%以內。
 
表2 樣品檢測結果
 
體積 樣品類型 Q定量 Feyond-F100 差值 偏差
1 文庫 104 105.079 -1.079 -1.0%
1 文庫 74.2 74.102 0.098 0.1%
1 文庫 77.4 75.628 1.772 2.3%
1 文庫 22.6 22.245 0.355 1.6%
1 文庫 Out of range 148.53 / /
1 文庫 52.4 53.455 -1.055 -2.0%
1 文庫 84.6 87.402 -2.802 -3.3%
1 文庫 11.5 10.8 0.7 6.1%
2 cfDNA 0.456 0.482 -0.026 -5.7%
2 cfDNA 1.27 1.287 -0.017 -1.3%
2 cfDNA 0.625 0.622 0.003 0.5%
2 cfDNA 0.758 0.794 -0.036 -4.7%
2 cfDNA 1.45 1.522 -0.072 -5.0%
2 cfDNA 1.48 1.542 -0.062 -4.2%
注:上述實驗數據來源奧盛實驗室
 
關于奧盛
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目前,公司擁有省級高新技術企業研究院,是2022年第一批浙江省”專精特新”中小企業。
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