 |
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||
| [發(fā)表評論] [本類其他產品] [本類其他供應商] [收藏] | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
 |
銷售商： 北京西美杰科技有限公司 | 查看該公司所有產品 >> |
藥典中核酸殘留限量規(guī)定
WHO和各國藥物注冊監(jiān)管機構一般只允許生物制劑中存在100 pg/劑量以下的殘留DNA，特殊情況下不大于10ng/劑量。根據雜質來源和純化工藝的不同，一般酵母、大腸桿菌表達的生物制品中DNA殘留量不超過10ng/劑量，Vero和MDCK細胞表達的疫苗等生物制品中DNA殘留量不超過100pg/劑量或10pg/劑量（根據宿主細胞和給藥方式的不同，限量要求不同）。
DENARASE® 全能核酸酶
DENARASE®全能核酸酶是一款通過微生物發(fā)酵生產的基因工程非限制性核酸內切酶，其基因序列來自粘質沙雷菌（Serratia marcescens），生產菌株是一種安全級別為S1級且不含內毒素的革蘭氏陽性芽孢桿菌（Bacillus.sp.） ，大大降低了內毒素污染風險。DENARASE®是c-LEcta GmbH公司在歐盟、美國、中國、印度、日本和韓國的注冊商標（https://denarase.com/）。其擁有的自主專利生產工藝，完全采用非動物性原料，不添加抗生素，符合歐盟GMP生產標準，通過ISO9001:2015質量體系認證，核酸酶純度大于99%，酶活性高，且無蛋白酶活性，是生物制品生產工藝中常用全能核酸酶的典型代表。
DENARASE®全能核酸酶能夠降解所有形式的DNA和RNA，包括單鏈、雙鏈、線性、超螺旋和環(huán)狀DNA、RNA及基因組DNA，對核酸序列沒有特異性。在純化工藝中使用DENARASE®全能核酸酶，可有效降低細胞裂解液粘度，改善蛋白純化工藝，高效去除重組蛋白制品核酸污染，大幅降低終產品污染風險，滿足法規(guī)要求，在細胞治療、病毒載體疫苗等領域應用廣泛。DENARASE®全能核酸酶的DMF已經提交，目前正處于審核階段。
核酸酶活性的影響因素分析
DENARASE®全能核酸酶在廣泛的條件下仍有很強的生物酶活性，跟大多數生物酶一樣，核酸酶的活性也會隨溫度、pH值、Mg2+、緩沖體系和底物濃度等因素的改變而變化。為了更好的發(fā)揮核酸酶的活性，幫助使用者更快的摸索出適宜的反應條件，小編為各位提供一組對核酸酶活性影響較大的關鍵參數指標供參考。（數據來源于廠家驗證指導文件）
|
溫度 |
適宜反應溫度為37℃ |
|
pH值 |
適宜pH值范圍是8.0-9.0之間 |
|
Mg2+ |
適宜Mg2+濃度范圍是1-2mM |
|
單價陽離子濃度 |
推薦Na+和K+的濃度在100mM以下 |
|
消泡乳化劑 |
4%的消泡乳化劑對核酸酶活性無明顯抑制作用 |
|
緩沖系統(tǒng) |
高濃度的緩沖體系會抑制核酸酶的活性 Tris鹽酸緩沖體系活性大于Tris磷酸鹽緩沖體系 |
|
底物濃度 |
DNA底物濃度不大于1mg/mL時活性較高 |
1 溫度
核酸酶適宜反應溫度為37℃。
2 pH值
不同緩沖體系結果顯示，適宜pH值范圍在8.0-9.0之間。
3 Mg2+
輔助因子Mg2+適宜濃度范圍是1-2mM，當增大Mg2+濃度時，酶活性會下降。
4 單價陽離子濃度
單價陽離子的存在會抑制核酸酶的活性，應控制Na+和K+的濃度在100mM以下。
5 消泡乳化劑
消泡乳化劑常被應用于工業(yè)生產的發(fā)酵液中，實驗結果顯示，4%的消泡乳化劑對核酸酶活性無明顯抑制作用。
6 緩沖系統(tǒng)
高濃度的緩沖體系會抑制核酸酶的活性，在Tris鹽酸緩沖體系中酶活性大于Tris磷酸鹽緩沖體系。隨著Tris磷酸鹽緩沖體系中磷酸鹽濃度的增加，酶活性降低，然而Mg2+離子濃度的增加會削弱其抑制作用。
DNA1 (standard):Sigma,D1626(salmon testes)
DNA2:Promega,D181A(herring sperm)
DNA3:GE Healthcare,27456501(200-6000 bps)
DNA4:Millipore,262015
7 底物種類及濃度
核酸酶對不同來源的DNA底物,降解的DNA片段長度不同，下圖為不同來源DNA底物，濃度在1mg/mL的結果。為了保持核酸酶的高活性，DNA底物濃度應不大于1mg/mL。
DENARASE®全能核酸酶產品信息
|
貨號 |
規(guī)格 |
酶活 |
詳情 |
|
20804-1M |
1 MU (1,000,000 Units) |
＞250 U/μl |
生產和灌裝全部符合EU GMP標準；適用于生物制品生產或有GMP要求的應用中添加。 |
|
20804-5M |
5 MU (5,000,000 Units) |
＞250 U/μl |
|
|
20804-100k |
100 kU (100,000 Units) |
＞250 U/μl |
生產符合EU GMP標準，灌裝按照ISO 9001標準執(zhí)行；適用于生物制品研發(fā)或沒有GMP要求的應用中添加。 |
|
20804-500k |
500 kU (500,000 Units) |
＞250 U/μl |
DENARASE® 全能核酸酶重要參數
c-LEcta GmbH公司為了確保DENARASE®全能核酸酶的穩(wěn)定和高質量水平，每個批次試劑均滿足以下參數的內部驗收標準。
酶活: >250 U/μL
純度: ≥99%
比活度：＞6*105 U/mg
蛋白酶活性：無
內毒素：＜0.25EU/kU
總菌落數：＜250cfu/200μL
免費試用進行中
關注西美杰微信公眾號（微信號：xmjsci），回復“核酸酶試用”，填寫表單即可申請c-LEcta DENARASE® 核酸酶免費試用機會，數量有限，先到先得！
