StarScript Ⅱ First-strand cDNA Synthesis Kit (StarScript第一鏈cDNA合成試劑盒)
貨 號 |
規 格 |
價 格 |
A212-02 |
20 rxn |
305元 |
A212-05 |
50 rxn |
686元 |
產品信息
StarScript II First-strand cDNA Synthesis Kit(cDNA第一鏈合成試劑盒)是專為兩步法RT-PCR第一步實驗設計的高靈敏度RT-PCR反應系統,可以從極低量的總RNA或poly(A) mRNA合成第一鏈cDNA,并能夠通讀GC含量高、二級結構復雜的RNA模板。該試劑盒使用重組表達的StarScript Reverse Transcriptase (RNase H-),通過定點突變去除了RNase H的活性,并增加了該酶與模板-引物的親和力,具有更好的熱穩定性,因此其DNA聚合酶的活性和持續合成能力均高于野生型M-MLV反轉錄酶,合成的cDNA產量更多、更長,最長可合成15 kb的cDNA。本試劑盒含有第一鏈cDNA合成所需的全部試劑,對后續的PCR或定量PCR實驗兼容性好,適合于各種耐熱DNA聚合酶。
用途
· cDNA第一鏈合成
· 引物延伸
特點
·
方便快捷:試劑盒包含反轉錄所需的全部試劑
·
超強延伸能力:合成的cDNA長度超過4 kb;對具有復雜二級結構的RNA模板,也能在42℃標準反應溫度下進行反轉錄,避免RNA在高溫下降解
·
高靈敏度:可對極少量的RNA模板進行良好的反轉錄反應
·
批次穩定:遵循標準化生產流程,經過嚴格的質量檢測
產品組分
以20 μl體系處理5 μg RNA為一個標準反應
組成成分 |
10次反應 |
50次反應 |
StarScript RTase (200 U/μl) |
10 μl |
50 μl |
5 X RTase buffer |
120 μl |
600 μl |
0.1M DTT |
80 μl |
200 μl |
RNase inhibitor (RNasin) |
8 μl |
40 μl |
Oligo dT Primer(0.5 mg/ml) |
10 ml |
50 μl |
Random Primer (150 ng/μl) |
10 ml |
50 μl |
10 mM dNTP Mix |
15 μl |
65 μl |
DEPC-ddH2O |
200 μl |
1 ml |
保存條件
-20℃恒溫保存一年
活性定義
一個活性單位的反轉錄酶定義為在37℃、10分鐘條件下,使1 nmol 的脫氧核糖核酸摻入酸性沉淀物質所需的酶量。
5 x反應緩沖液成分
250 mM Tris-HCl (pH 8.3 at 25°C), 375 mM KCl, 15 mM MgCl2
質量控制
· SDS-PAGE電泳檢測純度≥95%
· 無RNA酶、DNA酶污染
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* 內部質控實驗結果。插入PCR片段長度為800 bp。實際應用中, 依插入片段長度和特點不同, 結果可能不同。
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