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F81(貓腎細(xì)胞)產(chǎn)品概述:
細(xì)胞名稱 |
F81(貓腎細(xì)胞) |
種屬 |
貓 |
年齡(性別) |
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組織來(lái)源 |
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生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) |
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背景描述 |
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生長(zhǎng)培養(yǎng)基 |
RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
F81(貓腎細(xì)胞)操作說(shuō)明:
1)對(duì)于常溫運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,收到細(xì)胞后,檢查是否有運(yùn)輸問(wèn)題,即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒(méi)有運(yùn)輸問(wèn)題,請(qǐng)75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時(shí)間一般為6-12小時(shí)后,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開(kāi)始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系,A2780(人卵巢癌細(xì)胞)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄,通過(guò)郵件發(fā)送給我們做及時(shí)狀態(tài)跟蹤。
2)對(duì)于干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,請(qǐng)取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。
F81(貓腎細(xì)胞)注意事項(xiàng):
1)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開(kāi)封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問(wèn)題解決。
2)對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來(lái)保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長(zhǎng)速度。
3)對(duì)于生長(zhǎng)不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過(guò)程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長(zhǎng),而旁邊則為一塊空白),此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
F81(貓腎細(xì)胞)下面介紹幾種細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常見(jiàn)的污染:
一)桿菌污染:培養(yǎng)基中加入抗生素可以減少此種污染,但也不是絕對(duì)的。
二)支原體污染:傳說(shuō)中的黑焦蟲(chóng),長(zhǎng)得暴快。24小時(shí)就滿視野都是了。污染源大多數(shù)情況下是培養(yǎng)用血清。
三)念珠菌污染:似乎無(wú)處不在,而且頑固得很。長(zhǎng)得暴快(12h就能在細(xì)胞上面密布)。培養(yǎng)液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細(xì)胞上,高倍鏡下呈樹(shù)枝狀或葡萄狀。
四)霉菌污染、比較常見(jiàn)的一種污染,常常來(lái)源于污染的空氣、水和器械。
EC711 hUC-MSC 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 人 DMEM 貼壁
EC696 MBT-2 小鼠膀胱癌細(xì)胞 小鼠 1640 貼壁
EC698 32D Clone3 小鼠骨髓淋巴母細(xì)胞 小鼠 DMEM 貼壁
EC699 A-72 犬癌細(xì)胞 犬 1640 貼壁
EC712 BaF3 小鼠原B細(xì)胞 小鼠 IMDM 懸浮
EC435 IR983F 大鼠骨髓瘤細(xì)胞 大鼠 IMDM 懸浮
EC713 SF9 昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞 昆蟲(chóng) Grace's Insect medium 懸浮+貼壁
EC714 Ishikawa 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 人 EMEM 貼壁
EC738 HCEC 人角膜上皮細(xì)胞 人 1640 貼壁
EC715 HCC1500 人乳腺管癌細(xì)胞 人 DMEM 貼壁
EC716 Th17 小鼠輔助性T細(xì)胞 小鼠 1640 懸浮
EC717 Tregs 小鼠調(diào)節(jié)T細(xì)胞 小鼠 1640 懸浮
EC718 HM1900 人小膠質(zhì)細(xì)胞 人 DMEM 貼壁
EC719 NIT-1 小鼠胰島素瘤β細(xì)胞 小鼠 DMEM 貼壁
EC750 NCI-H187 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞 人 1640 懸浮
EC721 MARC-145 猴腎細(xì)胞 猴 DMEM 貼壁
EC722 ROMAS 人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞 人 1640 懸浮
EC723 TH1 小鼠調(diào)節(jié)T細(xì)胞 小鼠 1640 懸浮