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轉基因大豆 GTS40-3-2 品系基因定性檢測試劑盒產品說明書(中文版)
主要用途
YIJI 轉基因大豆 GTS40-3-2 品系基因定性檢測試劑是一種旨在根據品系特異性轉基因分子標志和內
源性保守序列設計引物，針對種子、食品、飼料等樣本 DNA 進行 PCR 擴增，獲得特異性條帶，來識別或
定性鑒定其轉基因大豆成分的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。
可以被用于各種種子、食品、飼料等大豆品系 GTS-40-3-2 的鑒定。可用于后續測序、載體克隆等實驗。產
品即到即用，性能穩定，操作簡便，擴增特異。
技術背景
轉基因農產品（genetically modified organism；GMO）成為食品安全的重要問題，標記和監測作為市場準入
的法律依據。目前至少有 40 多種轉基因農作物作為食品使用，其中大豆（soybean）是常見品種之一。由
美國孟山都（Monsanto）公司開發的品系 GTS-40-3-2，1996 年進入市場，其商標名稱為 RoundReady Soybean
（RRS），已經有 100 多種品種（varieties）。品系 GTS-40-3-2 由花椰菜花葉病毒（cauliflower mosaic virus）
35S 啟動子（promoter）、矮牽牛（Petunia hybrida）的葉綠體轉運肽（chloroplast transit peptide；CTP）基
因和葉綠體轉運肽 4 前導序列（leader sequence）、抗草甘膦（glyphosate）基因 5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-
磷 酸 合成 酶基因 （ 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase ； EPSPS ） 根 癌農 桿菌（ Agrobacterium、
tumefaciens） 胭脂氨酸合酶（nopaline synthase；NOS）轉錄終止子等外源性基因元素構成，通過 PV-GMGT04
載體轉化到大豆品種 A5403 而成。其中 CT4 EPSPS 基因，（1365 堿基，編碼 456 氨基酸），作為功能性抗
草甘膦基因，是品系 GTS-40-3-2 的分子標記。通過 CT4 EPSPS 基因交界片段和大豆內源性凝集素（lectin）
基因的引物設計，擴增其特異產物，進行識別、定性、定量鑒定種子、食品、飼料等轉基因大豆成分。
產品內容
YIJI 擴增液（Reagent A）
YIJI 品系引物液（Reagent B）
YIJI 補充液（Reagent C）
YIJI 大豆引物液（Reagent D）
產品說明書
微升
微升
毫升
微升
1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里；有效保證 6 月
用戶自備
PCR 級礦物油：用于封隔反應液
PCR 儀：用于樣品擴增
PCR 管或平板：用于 PCR 反應的容器
瓊脂糖凝膠電泳：用于擴增后電泳分析
1
實驗步驟
實驗開始前，從－20℃冰箱中取出試劑，放進冰槽里融化。然后進行下列操作：
1． 針對一個樣本，每次移出 xx 微升 YIJI 擴增液（Reagent A）到 PCR 管
2． 加入 xx 微升用戶自備的的待測 DNA 樣品（總量 100 至 200 納克）
3． 加入 xx 微升 YIJI 品系引物液（Reagent B）或 YIJI 大豆引物液（Reagent D）
4． 再加入 xx 微升 YIJI 補充液（Reagent C）（反應總量為 25 微升）
5． 即刻放進微型臺式離心機瞬時離心 5 秒，速度為 500g（或 2000RPM；例如 eppendorf 5415）
6． （選擇步驟）加入 50 微升用戶自備的 PCR 級礦物油（注意：參見注意事項 9）
7． 即刻進行熱啟動 PCR 反應：
溫度（℃）
95
95
60
70
70
時間
2 分鐘
30 秒
30 秒
30 秒
5 分鐘
1
35 至 40
循環
1
8． 反應完畢后，移取 5 微升進行 1.8%瓊脂糖凝膠電泳：
片段大小
大豆內源性基因產物
GTS-40-3-2 轉基因大豆基因產物
117 堿基
180 堿基
GeneID
K00821
AJ308514
9． 如果繼續測序鑒定，膠回收 PCR 產物（建議使用 YIJI 高質純化膠回收試劑盒；GMS20007.2）
10．進行后續的測序反應
注意事項
1． 本產品為 20 次操作
2． 操作時，須戴手套
3． 建議使用帶濾芯的槍頭，避免污染
4． 在－20℃冰箱里儲存的產品避免反復凍融
5． 出現大豆擴增條帶：證明為大豆或含有大豆的樣品
6． 出現品系擴增條帶：證明為 GTS-40-3-2 轉基因大豆或含有轉基因成分的樣品
7． 可以將擴增產物純化后，克隆到質粒中，然后進行測序
8． 如果需要測序，可以訂購測序引物
9． 根據用戶 PCR 儀的性能，決定是否加入礦物油（Mineral Oil）
10．本公司提供系列轉基因生物分析試劑產品
質量標準
1． 本產品經鑒定性能穩定
24小時電話： 13311756131
客服: QQ:2851717098
