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碳酸酐酶(牛紅血球)分子生物學技術(zt):
分子生物學技術 真核細胞DNA的制備與定量|質粒DNA的堿裂解法提取與純化|λ噬菌體DNA提取|DNA分子的限制性內切酶消化|DNA片段回收與純化|目的基因的亞克隆|PCR|引物參數計算|PCR產物的克隆|DNA序列測定|Southern 雜交|PCR-SSCP|細胞凋亡|RNA操作中的一般要求|RNA的制備|mRNA的分離與純化|RT-PCR|Northern Blot|RPA|ddPCR|原位雜交|原核表達|蛋白SDS電泳|Western|表達蛋白的分離與純化|表達蛋白的生物學活性的檢測|真核轉染。
碳酸酐酶(牛紅血球)試劑準備:
1.TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0)。
2.TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl。
3.裂解緩沖液:250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100mg/ml。
4.20% SDS
5.2mg/ml蛋白酶K
6.Tris飽和酚(pH 8.0)、酚/氯仿(酚∶氯仿=1∶1)、氯仿
7.無水乙醇、75%乙醇
碳酸酐酶(牛紅血球)注意事項:
1. 所有用品均需要高溫高壓,以滅活殘余的DNA酶。
2. 所有試劑均用高壓滅菌雙蒸水配制。
3. 用大口滴管或吸頭操作,以盡量減少打斷DNA的可能性。
4. 用上述方法提取的DNA純度可以滿足一般實驗(如Southern 雜交、PCR等)目的。如要求更高,可參考有關資料進行DNA純化。
碳酸酐酶(牛紅血球)相關試劑、蛋白及分子生物展示:XY100844PCR優化試劑盒1套XY90302氯化錳溶液,PCR級5mLXY70905明膠溶液,2%,PCR級1.5mLXY61203高GC DNA清除劑,PCR級1.5mLXY130307二氯化錳溶液,25mM,PCR級5mLXY130840硫酸鎂溶液,10mM,PCR級5mLXY130841石蠟油,PCR級10mLXY80205DMSO,PCR級1.5mLXY130506海藻糖溶液,1.5M,PCR級1.5mLXY70902甜菜堿溶液,5M,PCR級1.5mLXY70909綠如藍染料,PCR級0.1mL|1mLXY51208dNTP溶液,10 mM0.5mL(B)|5mL(B)XY131038dUTP溶液,100 mM0.4mLXY130920dITP溶液,100mM0.5mLXY120615dATP溶液,100mM0.5mLXY120617dTTP溶液,100mM0.5mLXY120619dGTP溶液,100mM0.5mLXY130917dCTP溶液,100mM0.5mLXY131139Deaza dGTP溶液,5mM0.4mLXY131140雙脫氧dNTP溶液,10mM40uL×4XY131141dNTP和引物清除劑100次XY131212PCR Mix染料10mL