堿性磷酸酶（AP）底物對硝基苯磷酸（pNPP）緩沖溶液產品說明書（中文版）

主要用途

堿性磷酸酶（AP）底物對硝基苯磷酸（pNPP）緩沖溶液是一種旨在通過堿性磷酸酶的催化，底物硝基苯磷酸水解產生可溶性黃色產物，以此鑒定堿性磷酸酶活性，進而確定目標分子表達的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于堿性磷酸酶標記的ELISA檢測。產品即到即用，性能穩定，操作便捷，敏感度高，顯色清晰，重復性好。

技術背景

對硝基苯磷酸（（p-nitrophenyl phosphate；PNPP）受到堿性磷酸酶的水解，釋放出黃色對硝基苯酚（p-nitrophenol）和磷酸（phosphate），通過分光光度儀檢測對硝基苯酚（405nm），來分析堿性磷酸酶的活性，靈敏度高，特異性好。

產品內容

染色液（Reagent A）     100毫升

產品說明書       1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，避免光照，有效保證3月

用戶自備

培養箱：用于反應孵育

酶標板：用于ELISA操作的容器

酶標儀：用于比色分析

實驗步驟

• 準備好ELISA檢測的相關處理：包括固著、封阻、一抗（或生物素）處理、堿性磷酸酶（AP）標記的二抗（或鏈霉親和素）以及清洗處理等步驟
• 小心加入200微升染色液（Reagent A）到酶標板的相應孔里
• 在37℃培養箱里孵育15至30分鐘，或直至出現黃色，避免光照
• 加入50微升用戶自備的終止液
• 即刻放進酶標儀（405nm波長）檢測：獲得吸光讀數

注意事項

• 本產品為100毫升規格
• 操作時，須戴手套
• 染色時間可以根據情況調整，通常為15至60分鐘
• 如果封閉欠佳，易造成背景顏色過深
• 本產品只能用于堿性磷酸酶（AP）標記的ELISA染色，不適合于免疫印跡染色
• 染色孵育后可以使用50微升3摩爾NaOH終止反應；終止后顏色穩定達2小時
• 如果染色過快或過深，建議稀釋一抗和二抗濃度
• 本公司提供系列ELISA試劑產品

質量標準

• 本產品經鑒定性能穩定
• 本產品經鑒定顯色清晰