植物組織可溶性親水總蛋白制備試劑盒產品說明書（中文版）

主要用途

植物組織可溶性親水總蛋白制備試劑是一種旨在通過兩性（zwitterionic）去垢劑和還原劑的作用，有效收集所有細胞內親水性蛋白質的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種新鮮或凍存植物組織，包括葉片（leaf）、谷粒（grain）、種子（seed）等樣品的親水性蛋白的制備。可直接用于后續蛋白電泳（SDS-PAGE）、西方雜交（Western blotting）、親和層析純化（affinity chromotagraphy）、免疫沉淀（immunoprecipitation）、蛋白質相互作用分析（protein-protein interaction）、特異性表達識別（specific expression identification）和質譜分析等。產品即到即用，性能穩定，操作便捷，收集效果好。

技術背景

親水性蛋白（hydrophilic protein）是一種可溶性的蛋白分子，在非變性兩性（zwitterionic）去垢劑和還原劑的幫助下，可以充分有效地萃取親水性蛋白，便于后續電泳和質譜分析。 

產品內容

清理液（Reagent A）      60毫升

裂解液（Reagent B） 20毫升

活性液（Reagent C）     100微升

產品說明書  1份

保存方式

保存清理液（Reagent A）在4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里，有效保證6月

用戶自備

液氮管：用于組織凍存處理

15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器

2毫升離心管：用于樣品操作的容器

（微型）臺式離心機：用于樣品操作

實驗步驟

實驗開始前，將試劑盒里的試劑從－20℃的冰箱里取出，室溫下凍融。然后進行下列操作。

• 準備好植物組織，例如葉片、種子等，并秤重200毫克 
• （選擇步驟）放進預冷的15毫升錐形離心管
• （選擇步驟）加入3毫升清理液（Reagent A）清洗
• （選擇步驟）抽去清理液
• 移入到一個液氮凍存管
• 即刻放進液氮罐過夜
• 次日從液氮罐里取出，即刻（最快速度）用研磨棒碾碎組織成粉末狀（注意：切莫使組織凍融）
• 放進一個新的預冷的2毫升離心管
• 加入1毫升裂解液（Reagent B）（注意：如果裂解液（Reagent B）出現結晶析出，可以溫育后使用） 
• 加入5微升活性液（Reagent C）
• 強力渦旋震蕩30秒，充分混勻
• 室溫下孵育30分鐘，期間每隔5分鐘渦旋震蕩5秒
• 即刻放進微型臺式離心機離心30分鐘，速度為16000g
• 小心移取上清液到新的2毫升離心管（注意：避免觸及沉淀顆粒）
• 放進－70℃的冰箱里備用
• 或放進冰槽里，繼續后續操作

注意事項

• 本產品為20次操作
• 操作時須戴手套
• 建議一次操作的組織重量在10至250毫克
• 建議使用新鮮或冰凍保護良好的植物組織
• 如果組織含有高濃度的多糖和多酚，建議使用多糖/多酚植物組織蛋白制備預處理試劑盒－30089
• 碾碎組織步驟：可以將液氮處理的組織放進研缽研磨成粉
• 如果放在－70℃冰箱里儲存備用，避免反復凍融
• 本公司提供系列植物組織蛋白制備試劑產品
    

質量標準

• 本產品經鑒定性能穩定
• 本產品經鑒定無蛋白酶污染