石蠟切片總膽固醇舒爾茨間接染色試劑盒產品說明書（中文版）

主要用途

YIJI石蠟切片總膽固醇舒爾茨間接染色試劑是一種旨在通過特殊脫蠟處理和鐵礬氧化預處理技術，進而使用舒爾茨反應試劑特異性與膽固醇反應，形成短暫性藍綠色顯色，分析石蠟包埋組織切片中（最大程度保留的）總膽固醇的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良舒爾茨經典方法、成功實驗證明的。主要適用于各種人體和動物組織石蠟切片中總膽固醇的檢測。廣泛用于組織病理生理的研究。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定，顯色敏感。

技術背景

膽固醇（cholesterol）是一類稱之為固醇類（sterols）或聚類異戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene）的多環化合物（polycyclic compound）。其分子式為cholest-5-en-3β-ol。膽固醇以游離（free form）和脂化結合（ester）兩種形式廣泛存在于所有動物組織中，主要以非脂化形式存在于細胞膜中。在膜功能和脂代謝以及激素合成中起著重要作用。舒爾茨（Schultz Reaction）染色技術通過鐵礬氧化預處理，然后使用混合酸還原游離和結合膽固醇，呈現藍綠色顯色。由于石蠟包埋的組織切片在去石蠟的過程中，有機溶劑諸如二甲苯等容易破壞和減少組織中的膽固醇成分，因此使用非二甲苯類脫蠟，以最大程度保護組織中的膽固醇成分是舒爾茨染色的關鍵。

產品內容

YIJI脫蠟液（Reagent A）          毫升

YIJI凈化液（Reagent B）   毫升

YIJI清理液（Reagent C）   毫升

YIJI預處理液（Reagent D）   毫升

YIJI強化液（Reagent E）   毫升

YIJI穩定液（Reagent F）   毫升

YIJI染色液（Reagent G）   毫升

產品說明書   1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；YIJI預處理液（Reagent D）避免光照；試劑具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月

用戶自備

培養箱：用于樣品反應孵育

光學顯微鏡：用于樣品染色后觀察分析

實驗步驟

一、樣品脫蠟處理

• 取出待測的6微米厚的石蠟包埋的組織切片
• 放進80℃烘箱，孵育30分鐘
• 室溫下靜置15分鐘
• 小心加上xx微升YIJI脫蠟液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育5分鐘
• 小心移去切片上的YIJI脫蠟液（Reagent A）
• 重復實驗步驟4至6一次
• 小心加上xx微升YIJI凈化液（Reagent B）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育5分鐘
• 小心移去切片上的YIJI凈化液（Reagent B）
• 小心加上xx微升YIJI清理液（Reagent C）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 室溫下孵育3分鐘
• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent C）

二、樣本染色處理

• 小心加上xx微升YIJI預處理液（Reagent D），鋪滿整個切片樣品表面
• 37℃濕潤培養箱孵育4小時，避免光照和干化
• 小心移去切片上的YIJI預處理液（Reagent D）
• 小心加上xx微升YIJI強化液（Reagent E）
• 室溫下孵育20分鐘
• 小心移去切片上的YIJI強化液（Reagent E）
• 重復實驗步驟4至6二次
• 小心加上xx微升YIJI清理液（Reagent A），清洗樣品表面
• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent A）
• 小心加上xx微升YIJI穩定液（Reagent F）
• 室溫下孵育10分鐘
• 小心移去切片上的YIJI穩定液（Reagent F）
• 空氣中晾干
• 小心加上xx微升預冷的YIJI染色液（Reagent G），鋪滿整個切片樣品表面
• 即刻放上蓋玻片
• 在一般光學顯微鏡下觀察：膽固醇陽性呈現藍綠色

注意事項

• 本產品為50次操作
• 試劑含有腐蝕性酸性物質，注意操作安全
• 操作時，須戴手套
• 操作時，避免污染母液
• 建議使用玻璃染色缸，除說明書規定之外
• 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿樣品表面
• 染色后數分鐘至數小時，切片藍綠色會褪色甚至消失
• 樣品染色完成后，即刻進行光學顯微鏡觀察 
• 本公司提供系列組織細胞膽固醇染色試劑產品

質量標準

• 本產品經鑒定性能穩定
• 本產品經鑒定顯色清晰