細胞轉染液（核心成分為線性聚乙烯亞胺，也稱作 LPEI），是新一代的轉染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團 形
成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用，并通過胞吞作用進入細胞。除了具有陽離子脂質體（如：
Lipo2000,3000）的轉染效率高，操作簡單，適用范圍廣，重復性好等特點外，還具有在體內，轉染效率高，細胞毒性低等特點。
      EZ Trans 是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網絡
在任何 pH 下都能充當有效的“質子海綿”體。其轉染性能好于樹枝狀聚合物，而且它的細胞毒性低。
使用方法
1. 接種細胞：用膠原酶消化細胞并計數（不建議用胰酶）。轉染前 18-24 小時進行細胞的鋪板，以便在轉染時，貼壁細胞的密度
      大約在 80%左右。注：培養(yǎng)液中的血清和抗生素不影響轉染效率。
2. 準備 EZ Trans-DNA 復合物
      1）轉染前將所有試劑置于室溫 10 分鐘。下面，以轉染 24 孔板培養(yǎng)皿為例，說明轉染的具體方法（如果在別的培養(yǎng)器皿中進行轉染，各試劑建議使用量見表 1.：
      2）將 1 μg 質粒 DNA 稀釋到 40 μL 無血清的高糖 DMEM 培養(yǎng)基，用移液槍吹吸 3-4 次。
      3）將 3 μL EZ Trans 轉染試劑稀釋到 40 μL 無血清的高糖 DMEM 培養(yǎng)基，用移液槍吹吸 3-4 次。
      注： 無血清的高糖 DMEM 培養(yǎng)基是稀釋液， 不能使用含血清的培養(yǎng)基（ 包括 Opti-MEM） 進行 DNA 和 EZ Trans 轉染試劑的稀釋！因為 EZ Trans-DNA 轉染復合物的形成過程不能含有血清。
      4）將稀釋好的 EZ Trans 轉染試劑一次性全部加入到已稀釋好的質粒 DNA 中，立即用移液槍吹吸 3-4 次。
      注： 此混合的順序不能反向進行！
      5）室溫放置 10-15 分鐘，以形成 EZ Trans-DNA 復合物。

表1：不同培養(yǎng)體積對應的待轉DNA、EZ Trans、稀釋液用量

3. 轉染細胞
1）將上述 80 μL EZ Trans-DNA 轉染復合物均勻滴入到含細胞的培養(yǎng)皿中。輕輕晃動培養(yǎng)皿或輕微渦旋，讓 EZ Trans-DNA
復合物分散均勻。
2）在 CO₂ 培養(yǎng)箱中 37℃下孵育細胞，轉染后 12-18 小時，去除含 EZ Trans-DNA 復合物的培養(yǎng)液。（若細胞形態(tài)欠佳，可
在轉染 3-5h 后，添加 1/2 體積的包含 30%血清的生長培養(yǎng)基，在轉染 12-18 小時后完全去除含 EZ Trans-DNA 復合物的培養(yǎng)液，
用含血清和抗生素的新鮮培養(yǎng)液。）
3）轉染后最快 7h 即可檢測到轉入基因的表達，可根據需要在 24-48 小時內檢測轉染效率。
注： 篩選穩(wěn)定轉染細胞株， 可在上述操作后（ 轉染細胞 24 小時后） ， 將細胞傳代至新鮮的生長培養(yǎng)基中（ 將細胞稀釋 10 倍以
上） ， 在 CO₂培養(yǎng)箱中 37℃孵育過夜。 在有轉染抗性基因相匹配的藥物篩選條件下， 約 1～2 周可篩選到耐藥性克隆， 在這期間需經常更換含篩選藥物的生長培養(yǎng)基。 

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