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設(shè)備原理
傳統(tǒng)的軟X射線顯微鏡所需的X射線需要同步輻射光源產(chǎn)生,意味著顯微鏡必須位于占地?cái)?shù)千平方米以上的同步輻射實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。SXT-100的核心技術(shù)是一種小尺寸高性能軟X射線光源,可放置于一般的實(shí)驗(yàn)室內(nèi),發(fā)射的軟X射線經(jīng)過特有的自愈光學(xué)元件收集、過濾并將軟X射線聚焦到待成像的細(xì)胞樣本上。軟X射線成像在電磁波譜中的“水窗口”區(qū)域的波長下進(jìn)行,水不吸收X射線,對X射線相對透明,但有機(jī)分子會(huì)吸收這些X射線,從而使軟X射線圖像具有高對比度。
設(shè)備特點(diǎn)
☆ 細(xì)胞以接近原生狀態(tài)進(jìn)行成像
☆ 最高40nm的3D超分辨成像
☆ 多角度照射,成像更均勻
☆ 圖像具有高對比度,無需染色等對比增強(qiáng)方法
☆ 具有多通道熒光成像功能
☆ 制樣步驟簡單
設(shè)備參數(shù):
參數(shù) |
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軟X射線顯微鏡 |
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視野 |
30 μm(放大倍數(shù)900x) |
圖像3D分辨率 |
約30 nm(半間距) |
圖像獲取時(shí)間 |
<2小時(shí)(每100個(gè)2D投射) |
熒光顯微鏡 |
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熒光通道 |
5通道:DAPI,GFP,RFP,Cy5,Cy7 |
樣品 |
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樣品裝載 |
碳支持膜銅網(wǎng) 超細(xì)玻璃毛細(xì)管 |
樣品旋轉(zhuǎn)角度 |
±60°(銅網(wǎng)) ±90°(毛細(xì)管) |
樣品類型 |
貼壁細(xì)胞(銅網(wǎng)) 懸浮細(xì)胞(毛細(xì)管) |
• 在含ZrO納米顆粒的環(huán)境下培養(yǎng)4h的H8N8細(xì)胞
• 人支氣管上皮細(xì)胞
• 海拉細(xì)胞的線粒體
發(fā)表文章:
• Fahy, K., Kapishnikov, S., Donnellan, M., McEnroe, T., O'Reilly, F., Fyans, W., & Sheridan, P. (2024). Laboratory based correlative cryo-soft X-ray tomography and cryo-fluorescence microscopy. Correlative Light and Electron Microscopy V, 293.
• Fahy, K., Weinhardt, V., Vihinen-Ranta, M., Fletcher, N., Skoko, D., Pereiro, E., ... & McEnroe, T. (2021). Compact Cell Imaging Device (CoCID) provides insights into the cellular origins of viral infections. JPhys Photonics, 3(3).
• Kapishnikov, S., Hempelmann, E., Elbaum, M., Als‐Nielsen, J., & Leiserowitz, L. (2021). Malaria pigment crystals: The achilles′ heel of the malaria parasite. ChemMedChem, 16(10), 1515-1532.
• Kapishnikov, S., Staalsø, T., Yang, Y., Lee, J., Perez-Berna, A. J., Pereiro, E., ... & Als-Nielsen, J. (2019). Mode of action of quinoline antimalarial drugs in red blood cells infected by Plasmodium falciparum revealed in vivo. Proceedings of the National Academy of Sciences, 116(46), 22946-22952.
• Kapishnikov, S., Leiserowitz, L., Yang, Y., Cloetens, P., Pereiro, E., Awamu Ndonglack, F., ... & Als-Nielsen, J. (2017). Biochemistry of malaria parasite infected red blood cells by X-ray microscopy. Scientific reports, 7(1), 802.