■ 制品內容 (50 次量) |
本試劑盒分Part I 與 Part II兩部分。
□ Part I -20℃保存 |
50×DTT Solution |
700 μl |
Recombinant DNase I (RNase-free;5 U/μl) |
1,000 U |
10×DNase I Buffer |
1 ml |
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□ Part II 室溫 (15-25℃) 保存 |
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Buffer PE |
28 ml |
Buffer NB |
1.5 ml × 2 |
Buffer RL*1*2 |
28 ml |
Buffer RWA*2 |
28 ml |
Buffer RWB*3 |
30 ml |
RNase Free dH2O |
15 ml |
RNA Spin Column |
50 套 |
RNase Free Collection Tube (1.5 ml) |
50 支 |
*1操作前請在Buffer RL中加入50×DTT Solution,每1 ml的Buffer RL中加入20 μl 的50×DTT Solution。
此裂解液最好現用現配。加入50×DTT Solution的Buffer RL裂解液可在室溫下放置1個月。 |
*2含有強變性劑,應避免與皮膚、衣物等接觸。若不小心接觸到眼睛或皮膚時,請立即到醫院進行處理。 |
*3首次使用前,向Buffer RWB中添加70 ml的100%乙醇。 |
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■ 制品說明 |
本試劑盒是小量提取植物組織Total RNA的試劑盒。試劑盒采用了特別的裂解系統,可以對各種簡單的植物組織材料 (葉片、莖、幼苗等) 、富含多糖多酚的植物組織材料 (果實、種子等) 、真菌等進行RNA的提取,適用范圍廣泛。按照標準流程,使用本試劑盒可以有效提取分子量大于200 nt的RNA,也可以按照可選步驟提取得到包含Small RNA (<200 nt) 的Total RNA。試劑盒中包含了RNA提取所需的全部試劑,無需額外購買其它試劑。
本試劑盒具有高效、快速、方便之特點,組織或細胞裂解后,提取操作僅需30分鐘便可完成。提取過程中無需苯酚氯仿抽提等步驟。利用該試劑盒提取的RNA純度高,很少含蛋白質及基因組DNA污染。使用本試劑盒可以從50~100 mg植物組織中純化得到多至數十微克的高純度RNA。提取得到的RNA可以直接用于Northern雜交、斑點雜交、mRNA純化、體外翻譯、RNA分解酶的保護分析、RT-PCR、Real Time RT-PCR、構建cDNA文庫等各種分子生物學實驗。 |
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■ 保存與運輸 |
1. 本試劑盒Part I部分在-20℃保存和運輸。
2. 本試劑盒Part II部分可以在室溫下 (15~25℃) 保存和運輸。 |
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■ 實驗操作流程圖 |
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■ 注意事項 |
1. Buffer RL 若出現沉淀,請于60℃加熱溶解,待恢復至室溫后使用。
2. 操作前請在Buffer RL中加入50×DTT Solution至終濃度為2%,即每1 ml的Buffer RL中加入20 μl的50×DTT Solution。此裂解Buffer最好現用現配。加入50×DTT Solution的Buffer RL可在室溫放置1個月。
3. Buffer PE 若出現沉淀,請于37℃加熱溶解,待恢復至室溫后使用。
4. Buffer RWB在首次使用前,請添加70 ml的100%乙醇,混合均勻。
5.RNA Spin Column的最大容積為600 μl,使用時如果液體的體積超出最大容積,請分批加入。
6.實驗操作如無特殊說明,均在室溫進行。 |
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