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DNeasy PowerWater Kit (50)
強力水樣DNA 提取試劑盒
(提取已過濾水樣濾膜微生物基因組 DNA)
簡介
DNeasy PowerWater Kit (50) 可提取各種過濾好的水樣基因組 DNA。利用我們的專利抑制因子去除技術
®(IRT)，就算水樣中含大量污染物，也能順利地提取出高質量高得率的 DNA。該試劑盒可兼容市面上所有類型的水樣濾膜。與我們的 UltraClean® Water DNA Isolation Kit 不用在于：研磨珠套管改用了創新優化的研磨珠混合、修改的裂解緩沖液配方、IRT 技術和減少樣品體積使得可以在一個小型離心管中完成所有操作。最終 DNA 體積為 100μl，可直接用于下游實驗。
操作預覽
DNeasy PowerWater Kit (50)從過濾好的水樣濾膜開始。已預先裝入濾膜的滅菌 100ml 一次性過濾漏斗可單獨從 MOBIO 訂購，或自備。把濾膜放入到特殊的含有混搭研磨珠的 5ml 珠磨研磨管中，加入裂解緩沖液，在渦旋儀的驅動下對濾膜微生物進行快速充分裂解。去除蛋白和抑制因子后，總 DNA 選擇性吸附到 MOBIO 的硅膠離心柱上。高質量的 DNA 洗脫下來可直接用于 PCR、qPCR 等下游實驗。
12、加入 200μl PW2，稍微渦旋混勻，4℃孵育 5min。
這一步發生了什么：PW2 溶液為 IRT 技術的又一個重要組成。第二次移除非腐植酸、細胞碎片、蛋白等非
DNA 的有機、無機成分。必須去除所有的非 DNA 有機、無機成分，否則將影響 DNA 純度并抑制下游 DNA
實驗。
13、13000g 離心 1min。
14、避開沉淀轉移上清到一個干凈的 2ml Collection Tube（試劑盒提供）中。
這一步發生了什么：進一步去除非 DNA 有機和無機物。為了確保 DNA 得率和質量，避免吸入任何沉淀物。
15、加入 650μl PW3，渦旋混勻。
注意：PW3 溶液若有沉淀，使用前先 55℃水浴 5-10min，可趁熱使用。
這一步發生了什么:PW3 為高濃度鹽溶液。DNA 在高鹽條件下將選擇性地吸附到離心柱硅膠濾膜上。而濾膜上非 DNA 有機無機物仍然有可能少量殘留。
16、加載 650μl 上清到一個 Spin Filter 中，13000g 離心 1min。棄去濾液重復上述步驟直到過濾完所有上清。注意：通常需要加樣兩次。
這一步發生了什么：DNA 選擇性地吸附到離心柱硅膠濾膜上，濾液不含 DNA 成分。
17、把 Spin Filter 放到一個干凈的 2ml Collection Tube（試劑盒提供）中。
這一步發生了什么：PW3 為高濃度鹽溶液，Spin Filter 轉移到新的 Tube 管中，等待沖洗步驟，以提高 DNA
得率和純度。
18、PW4 使用前先搖勻。加入 650μl PW4，13000g 離心 1min。
這一步發生了什么：PW4 為含酒精沖洗液，用于沖洗離心柱濾膜上的 DNA。去除殘留的鹽分等雜質。
19、棄去濾液，加入 650μl PW5 溶液，13000g 離心 1min。
這一步發生了什么：PW5 能確保完全去除 PW4 成分，可提高 DNA 純度和得率。
20、棄去濾液，13000g 離心 2min，充分甩干沖洗液。
這一步發生了什么：二次離心去除殘留 PW5 溶液。PW5 溶液含酒精，必須充分去除以免影響 DNA 后續實驗。
21、把 Spin Filter 放到一個干凈的 2ml Collection Tube（試劑盒提供）中。
22、加入 100μl PW6 到離心柱白色濾膜中心。
這一步發生了什么：PW6 溶液（無菌洗脫液）加到濾膜中心濕潤整個濾膜。DNA 在高鹽條件選擇性吸附到硅膠濾膜上，PW6 溶液（10mM Tris）無鹽條件下選擇性地洗脫下來。
可選：此步也可以用無菌的 DNA-Free PCR Grade Water（貨號：17000）洗脫硅膠濾膜上的 DNA。PW6 溶液不含EDTA。若為減少 DNA 降解，可用無菌 TE 溶液代替 PW6 洗脫 DNA。
23、13000g 離心 1min。
24、棄去離心柱。此時 DNA 可直接用于下游實驗，無需進一步處理。建議 DNA（-20℃-80℃）保存。PW6 溶液不含 EDTA。
強力水樣DNA 提取試劑盒
(提取已過濾水樣濾膜微生物基因組 DNA)
| 貨號 | 提取次數 | 濾膜 |
| 14900-50-NF | 50 次 | 不含 |
| 14900-100-NF | 100 次 | 不含 |
簡介
DNeasy PowerWater Kit (50) 可提取各種過濾好的水樣基因組 DNA。利用我們的專利抑制因子去除技術
®(IRT)，就算水樣中含大量污染物，也能順利地提取出高質量高得率的 DNA。該試劑盒可兼容市面上所有類型的水樣濾膜。與我們的 UltraClean® Water DNA Isolation Kit 不用在于：研磨珠套管改用了創新優化的研磨珠混合、修改的裂解緩沖液配方、IRT 技術和減少樣品體積使得可以在一個小型離心管中完成所有操作。最終 DNA 體積為 100μl，可直接用于下游實驗。
操作預覽
DNeasy PowerWater Kit (50)從過濾好的水樣濾膜開始。已預先裝入濾膜的滅菌 100ml 一次性過濾漏斗可單獨從 MOBIO 訂購，或自備。把濾膜放入到特殊的含有混搭研磨珠的 5ml 珠磨研磨管中，加入裂解緩沖液，在渦旋儀的驅動下對濾膜微生物進行快速充分裂解。去除蛋白和抑制因子后，總 DNA 選擇性吸附到 MOBIO 的硅膠離心柱上。高質量的 DNA 洗脫下來可直接用于 PCR、qPCR 等下游實驗。
操作步驟
PW1 溶液使用前 55℃預熱 5-10min。趁熱使用。使用前檢查 PW3，若有沉淀則 55℃水浴 5-10min，可趁熱使用。
1、使用離心機和一次性或可重復利用漏斗過濾水樣。含 0.22μm 或 0.45μm 濾膜的一次性濾過漏斗可從 MO BIO
單獨訂購。過濾水樣的體積視水樣微生物豐度和渾濁程度而定。（水樣類型參照附文疑難點）。這一步發生了什么：過濾水樣，微生物截留到濾膜表面及濾孔中。
2、取下過濾裝置漏斗部分。
3、使用兩只滅菌鑷子從邊緣夾起濾膜，濾膜上面朝內卷成圓筒狀。
注意：不要卷太緊或折疊濾膜。“卷濾膜方法”可在以下網址觀看展示視頻。
http://www.anbiosci.com/products/14900.htm
4、把濾膜放入到 5ml PowerWater® Bead Tube 中。
這一步發生了什么：稍卷濾膜放入PowerWater® Bead Tube 中裝備珠磨研磨。
5、往 PowerWater® Bead Tube 加入 1 ml PW1 溶液。
注意：PW1 溶液使用前必須先預熱溶解沉淀并趁熱使用。若樣品中含有難裂解微生物（真菌、海藻），可加入額外水浴步驟。詳見附文疑難點。
這一步發生了什么：PW1 為含有去垢劑的強力裂解試劑，可破壞細胞壁，去除非 DNA 的有機、無機成分。同時也是 IRT 技術的組成之一。低溫時會形成白色沉淀。55℃水浴不會影響其成分活性。需要趁熱使用。
6、把 PowerWater® Bead Tube 安裝在 MO BIO 渦旋儀適配器，貨號：13000-V1-15 或 13000-V1-5。
7、最大轉速渦旋振蕩 5min。
這一步發生了什么：渦旋振蕩的機械作用力在打碎濾膜表面沉積物釋放出截留細胞的同時輔助裂解細胞。使用渦旋儀適配器可提供相同的力矩和角度最大化研磨效果。避免使用膠帶固定，以免震動過程中松脫影響研磨效果。
8、室溫≤4000g 離心 1min。離心速度視乎離心機參數配置。（具備 15ml 離心條件可選步驟，不離心的情況會稍微減少獲得上清的量）。
9、使用 1ml 槍頭深入到研磨珠底部吸取上清，并轉移到一個干凈的 2ml Collection Tube（試劑盒提供）中。
注意：必須把槍頭深入到研磨珠底部。多次吸取確保取出所有上清。上清中混入研磨珠不影響后續。根據使用濾膜的類型，約可獲得 600-650μl 上清。
這一步發生了什么：從濾膜和研磨珠中獲得上清。
10、13000g 離心 1min。
這一步發生了什么：這一步去除混入的研磨珠、蛋白和細胞碎片。必須去除所有的非 DNA 有機、無機成分， 否則將影響 DNA 純度并抑制下游 DNA 實驗。
11、避開沉淀，轉移上清到一個干凈的 2ml Collection Tube（試劑盒提供）中。
深圳市安必勝科技有限公司 聯系電話：0755-8348 9872 傳真：0755-8348 9700 email：anbiosci@126.com QQ1: 854520684 QQ2:1362545403
PW1 溶液使用前 55℃預熱 5-10min。趁熱使用。使用前檢查 PW3，若有沉淀則 55℃水浴 5-10min，可趁熱使用。
1、使用離心機和一次性或可重復利用漏斗過濾水樣。含 0.22μm 或 0.45μm 濾膜的一次性濾過漏斗可從 MO BIO
單獨訂購。過濾水樣的體積視水樣微生物豐度和渾濁程度而定。（水樣類型參照附文疑難點）。這一步發生了什么：過濾水樣，微生物截留到濾膜表面及濾孔中。
2、取下過濾裝置漏斗部分。
3、使用兩只滅菌鑷子從邊緣夾起濾膜，濾膜上面朝內卷成圓筒狀。
注意：不要卷太緊或折疊濾膜。“卷濾膜方法”可在以下網址觀看展示視頻。
http://www.anbiosci.com/products/14900.htm
4、把濾膜放入到 5ml PowerWater® Bead Tube 中。
這一步發生了什么：稍卷濾膜放入PowerWater® Bead Tube 中裝備珠磨研磨。
5、往 PowerWater® Bead Tube 加入 1 ml PW1 溶液。
注意：PW1 溶液使用前必須先預熱溶解沉淀并趁熱使用。若樣品中含有難裂解微生物（真菌、海藻），可加入額外水浴步驟。詳見附文疑難點。
這一步發生了什么：PW1 為含有去垢劑的強力裂解試劑，可破壞細胞壁，去除非 DNA 的有機、無機成分。同時也是 IRT 技術的組成之一。低溫時會形成白色沉淀。55℃水浴不會影響其成分活性。需要趁熱使用。
6、把 PowerWater® Bead Tube 安裝在 MO BIO 渦旋儀適配器，貨號：13000-V1-15 或 13000-V1-5。
7、最大轉速渦旋振蕩 5min。
這一步發生了什么：渦旋振蕩的機械作用力在打碎濾膜表面沉積物釋放出截留細胞的同時輔助裂解細胞。使用渦旋儀適配器可提供相同的力矩和角度最大化研磨效果。避免使用膠帶固定，以免震動過程中松脫影響研磨效果。
8、室溫≤4000g 離心 1min。離心速度視乎離心機參數配置。（具備 15ml 離心條件可選步驟，不離心的情況會稍微減少獲得上清的量）。
9、使用 1ml 槍頭深入到研磨珠底部吸取上清，并轉移到一個干凈的 2ml Collection Tube（試劑盒提供）中。
注意：必須把槍頭深入到研磨珠底部。多次吸取確保取出所有上清。上清中混入研磨珠不影響后續。根據使用濾膜的類型，約可獲得 600-650μl 上清。
這一步發生了什么：從濾膜和研磨珠中獲得上清。
10、13000g 離心 1min。
這一步發生了什么：這一步去除混入的研磨珠、蛋白和細胞碎片。必須去除所有的非 DNA 有機、無機成分， 否則將影響 DNA 純度并抑制下游 DNA 實驗。
11、避開沉淀，轉移上清到一個干凈的 2ml Collection Tube（試劑盒提供）中。
深圳市安必勝科技有限公司 聯系電話：0755-8348 9872 傳真：0755-8348 9700 email：anbiosci@126.com QQ1: 854520684 QQ2:1362545403
12、加入 200μl PW2，稍微渦旋混勻，4℃孵育 5min。
這一步發生了什么：PW2 溶液為 IRT 技術的又一個重要組成。第二次移除非腐植酸、細胞碎片、蛋白等非
DNA 的有機、無機成分。必須去除所有的非 DNA 有機、無機成分，否則將影響 DNA 純度并抑制下游 DNA
實驗。
13、13000g 離心 1min。
14、避開沉淀轉移上清到一個干凈的 2ml Collection Tube（試劑盒提供）中。
這一步發生了什么：進一步去除非 DNA 有機和無機物。為了確保 DNA 得率和質量，避免吸入任何沉淀物。
15、加入 650μl PW3，渦旋混勻。
注意：PW3 溶液若有沉淀，使用前先 55℃水浴 5-10min，可趁熱使用。
這一步發生了什么:PW3 為高濃度鹽溶液。DNA 在高鹽條件下將選擇性地吸附到離心柱硅膠濾膜上。而濾膜上非 DNA 有機無機物仍然有可能少量殘留。
16、加載 650μl 上清到一個 Spin Filter 中，13000g 離心 1min。棄去濾液重復上述步驟直到過濾完所有上清。注意：通常需要加樣兩次。
這一步發生了什么：DNA 選擇性地吸附到離心柱硅膠濾膜上，濾液不含 DNA 成分。
17、把 Spin Filter 放到一個干凈的 2ml Collection Tube（試劑盒提供）中。
這一步發生了什么：PW3 為高濃度鹽溶液，Spin Filter 轉移到新的 Tube 管中，等待沖洗步驟，以提高 DNA
得率和純度。
18、PW4 使用前先搖勻。加入 650μl PW4，13000g 離心 1min。
這一步發生了什么：PW4 為含酒精沖洗液，用于沖洗離心柱濾膜上的 DNA。去除殘留的鹽分等雜質。
19、棄去濾液，加入 650μl PW5 溶液，13000g 離心 1min。
這一步發生了什么：PW5 能確保完全去除 PW4 成分，可提高 DNA 純度和得率。
20、棄去濾液，13000g 離心 2min，充分甩干沖洗液。
這一步發生了什么：二次離心去除殘留 PW5 溶液。PW5 溶液含酒精，必須充分去除以免影響 DNA 后續實驗。
21、把 Spin Filter 放到一個干凈的 2ml Collection Tube（試劑盒提供）中。
22、加入 100μl PW6 到離心柱白色濾膜中心。
這一步發生了什么：PW6 溶液（無菌洗脫液）加到濾膜中心濕潤整個濾膜。DNA 在高鹽條件選擇性吸附到硅膠濾膜上，PW6 溶液（10mM Tris）無鹽條件下選擇性地洗脫下來。
可選：此步也可以用無菌的 DNA-Free PCR Grade Water（貨號：17000）洗脫硅膠濾膜上的 DNA。PW6 溶液不含EDTA。若為減少 DNA 降解，可用無菌 TE 溶液代替 PW6 洗脫 DNA。
23、13000g 離心 1min。
24、棄去離心柱。此時 DNA 可直接用于下游實驗，無需進一步處理。建議 DNA（-20℃-80℃）保存。PW6 溶液不含 EDTA。
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