豬細小病毒PCR檢測試劑盒規格及成分
即用型指標Mix 3.0(1.5 mL)
專一性引物對 (100 μL)
陽性對照 (50 μL)
超純水 (1 mL)
說明書: 1 份

運輸保存:低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產品名稱:
豬細小病毒PCR檢測試劑盒
產品分類:PCR檢測試劑盒
產品編號:BH11611P
產品規格:50T
使用方法
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
使用方法
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取細菌樣品 DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 stn 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
1.標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3.先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
1.在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
2.換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5 拷貝/μL 的陽性對照。
3.換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。
4.NC 管中不加任何陽性對照。
5.從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值, 并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
一.PCR 檢測(20 μL 體系)
1.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次)
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對照,其他熒光 PCR 儀器(如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480)不需要使用 ROX。
建議 PCR 反應參數(具體 PCR 參數可以根據儀器不同而自行優化)
3. 數據采集
按所用儀器推薦的流程進行。本產品中所含的熒光染料在不結合DNA 時,最大吸收光譜在 471 nm,結合 DNA 時的最大吸收光譜在 500 nm, 最大發射光譜在 530 nm。
四、數據處理
以 stn 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
DL-薄荷醇 DL-Menthol (≥98%,HPLC) 89-78-1 20MG 標準品
云南紅豆杉Taxus yunnanensis 對輕基本 99-96-7 C7H6O3 ≥98% 倒千里光減18140
Protopanaxdiol原人參二醇30636-90-920mg/支
Prednisolone Tebate潑尼松龍醋酸特丁酯標準品7681-14-3 200mg
多脈瓜馥木Fissistigma balansae Corydalmine 紫堇達明堿 30413-84-4 C20H23NO4 ≥
益智(益智仁) Galangal(Alpinia oxyphylla) 1g
人參皂甙RdGinsqnosidqRd2702-93-8HPLC≥98%,20mg/vial
高效瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 暫不提供 暫不提供 暫不提供 50次,100次
絡塞琳84954-93-8Rowenin
三七素 Dencichine 5302-45-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
丁香 Syzygium aromaticum (L.)Merr. et Perry Syringic acid 丁香酸 530-57-4 C9H10O5 ≥98%
皇楊減HucngYcngjicn20mg/支
花椒毒素;8-甲氧基補骨脂素; 花椒毒內酯,氧化補骨脂素,黃原毒 8-metxoxypsoralen 298-81-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定扶伐他汀100800-200701常溫,避光100mg
Aacurium Besylate本磺酸阿曲庫銨標準品64228-81-5
乳糖發酵培養基250g用于大腸菌群發酵試驗
T1N1瓊脂 250(g) incubation media T1N1瓊脂 250(g)
明膠瓊脂培養基 Gelatin Agar Medium 250克 檢查細菌的明膠酶的能力
龍膽紫血液瓊脂基礎250用于鼠疫桿菌的選擇性培養incubationmedia龍膽紫血液瓊脂基礎250用于鼠疫桿菌的選擇性培養
葡萄糖酪胨瓊脂 250g 用于食品中臘樣芽孢桿菌鑒定和計數(APHA方法)
葡萄糖肉湯28060250g用于細菌培養,特別是檢測一次性使用衛生用品中溶血性鏈球菌(GB-2002)及檢測腸桿菌產氣。
Todd-Hewitt 肉湯 (CM0189) Oxoid incubation media Todd-Hewitt 肉湯 (CM0189) Oxoid
日本根霉 用葡萄糖、纖維糖生產酒精。 支/瓶
酵母粉瓊脂250g用于水中細菌總數的檢測(ISO標準)
液體連四鹽培養基 250g 用于沙門氏菌選擇性增菌培養。
注意事項
5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區域進行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進行上下倒置多次進行混勻)。
豬細小病毒PCR檢測試劑盒5.4 反應管中加好所有的試劑后,應盡快上PCR儀進行擴增,以免形成過多的二聚體。
5.5細胞培養物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度,建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養2-3天后送樣檢測。
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企業,主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑的銷售。主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養基、標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。
上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 先后與天津中醫學院、復旦大學、上海交通大學醫學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫大學、南京大學,暨南大學,南京工業大學,曙光醫院、華山醫院、瑞金醫院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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