技術特點:
1準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,結果一致性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需完全配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對,在延伸中產生熒光。
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件
14℃或-20℃
特點:
1.產品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速
2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果
【結果分析條件設定】
u 基線(Baseline)設定:應選擇該次實驗指數擴增前所有樣本熒光信號比較穩定的一段區域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應比最早出現指數擴增的樣本Ct值減少1~3個循環,建議基線設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的最高點。
【質控標準】
1. 陰性質控品的檢測結果應為陰性,無指數擴增期,Ct=40或無Ct;
2. 陽性質控品的檢測結果應為陽性,有明顯的指數擴增期,Ct值應小于等于35;
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
1. 陽性:有明顯的指數擴增期,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復核一次,若復核結果Ct<40且有指數擴增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;
3. 陰性:無指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗室環境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現假陽性結果;
2. 試劑運輸、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,可能會導致出現假陰性結果。
白前探針法PCR鑒定試劑盒注意事項:
建議加樣順序是陰性質控品、待檢樣本、陽性質控品。4. PCR擴增(擴增區)
1) 儀器設置(以ABI Prism 7500為例)
將PCR反應管放入PCR儀內,按照對應順序設置陰性質控品(NTC)、陽性質控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM,Quencher Dye為None,參比染料(Passive Reference)為 None。
2 ) 擴增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號,反應體系為25 μl。
透明質酸合酶3 Hyaluronan Synthase 3 31.25 1000 pg/ml 1
低糖基化IgA UdgIgA 0.625 20 ng/ml 0.1
透明質酸合酶1 Hyaluronan Synthase 1 4.375 140 mIU/ml 0.1
透明質酸合酶3 Hyaluronan Synthase 3 3.125 100 mIU/ml 0.1
沙眼衣原體抗原 chlamydia trachomatis 0 10
多巴胺 dopamine 12.5 400 pg/ml 1
ER脂筏相關蛋白2 ER Lipid Raft Associated Protein 2 12.5 400 pg/ml 1
25羥基維生素D3 25-hydroxy vitamin D3 2.5 80 μg/L 0.1
吻素 Kisspeptin 25 800 pg/ml 1
線粒體呼吸鏈復合物I mitochondrial respiratory Complex I 7.5 240 U/mL 1
幽門螺桿菌空泡毒素IgG Helicobacter pylori Vacuolating cytotoxin IgG 6.25 200 ng/ml 1
透明質酸合酶2 Hyaluronan Synthase 2 31.25 1000 pg/ml 1
胞內氯離子通道蛋白4 chloride intracellular channel protein 4 31.25 1000 pg/ml 1
Ⅳ型前膠原 ⅣPC 2 64 ng/ml 0.1
骨髓基質細胞抗原2 bonemarrowstromalantigen2 0.3125 10 ng/ml 0.1
靶向核糖核酸酶 targeted ribonuclease 6.25 200 IU/ml 1
脫氧核糖核酸酶Ⅰ deoxyribonuclease 3.125 100 IU/ml 0.1
1,1-二氧代-1,2-苯并異噻唑-3(2H)-酮,鈉鹽 糖精鈉水合物 可溶性糖精鈉 鄰苯甲酰磺酰胺備注:A288
鄰苯甲酰磺酰胺鈉 128-44-9
Saccharin sodium分子式:C7H5NNAO3S分子量:206.17
1,1-二氧代-1,2-苯并異噻唑-3(2H)-酮,鈉鹽 糖精鈉水合物 可溶性糖精鈉 鄰苯甲酰磺酰胺備注:A288
利谷隆 330-55-2
Linuron分子式:C9H10CLN2O2分子量:249.09
N-(3,4-二氯苯基)-N'-甲氧基-N'-甲基脲,直西龍備注:A02
雙去甲氧基姜黃素 24939-16-0
Bis(4-hydroxycinnamoyl)methane分子式:C19H16O4分子量:308.33
雙去甲氧基姜黃素 24939-16-0
備注:A02 AA
白前探針法PCR鑒定試劑盒Bis(4-hydroxycinnamoyl)methane分子式:C19H16O4分子量:308.33
備注:A02 AA
蝦青素 472-61-7
Astaxanthin分子式:C40H52O4分子量:596.84
(3S,3’S)-3,3’-二羥基-β,β-胡蘿卜素-4,4’-二酮 3,3'-二羥基-beta,beta-胡蘿卜素-4,4'-二酮 3,3'-二羥基-4,4'-二酮基-Β,Β'-胡蘿卜素醇備注:SB01
蝦青素 472-61-7
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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 是一家生物企業,主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑的銷售。主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養基、標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。
上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China) 先后與天津中醫學院、復旦大學、上海交通大學醫學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫大學、南京大學,暨南大學,南京工業大學,曙光醫院、華山醫院、瑞金醫院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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