|
||||||||||||||||||||||||||||||||||
[發(fā)表評論] [本類其他產(chǎn)品] [本類其他供應(yīng)商] [收藏] |
銷售商: 武漢英科生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
肺癌完全培養(yǎng)基是一種為促進肺癌原代細胞體外生長而設(shè)計的培養(yǎng)基。它是一種無菌的液體混合系統(tǒng),含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質(zhì)等。培養(yǎng)基基于碳酸氫鹽的緩沖體系,在5% CO2/95%空氣的培養(yǎng)箱中平衡時,pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方可以提供一個合適的平衡的營養(yǎng)環(huán)境,選擇性地促進體外人肺癌原代細胞的生長。
2~8℃避光保存2個月內(nèi)有效。
1.肺癌原代細胞培養(yǎng)
至少提前半小時使用稀釋后的Matrigel基質(zhì)膠預(yù)鋪培養(yǎng)瓶/板,使用前吸干基質(zhì)膠,用稀釋液潤洗一遍。將分離并計數(shù)后的細胞懸液參考說明書中細胞數(shù)量接種于培養(yǎng)瓶/板,補加完全培養(yǎng)基至所需體積,輕輕搖晃混勻,表面消毒后置培養(yǎng)箱,37 ℃ 、5 % CO2條件培養(yǎng);原代細胞初次接種后2-3 天內(nèi)勿動(利于細胞貼壁),第一次換液建議換半液。
2.肺癌原代細胞傳代
鏡下觀察細胞形成克隆,且匯合度80~90%時即可傳代;培養(yǎng)箱中取出細胞,棄舊培養(yǎng)液,加入適量0.05%胰酶,37℃孵育,5 min后拿出輕拍培養(yǎng)瓶/板側(cè)面,顯微鏡下觀察細胞消化情況;細胞消化至細胞變圓并開始脫落時用終止培養(yǎng)基終止消化,并將細胞轉(zhuǎn)移至離心管中,1500 rpm離心3 min;棄上清,以1-2 mL完全培養(yǎng)基重懸細胞,活細胞計數(shù),將細胞懸液按適合的細胞密度接種于培養(yǎng)瓶/板,補加完全培養(yǎng)基至所需體積,輕輕搖晃混勻,表面消毒后置培養(yǎng)箱,37 ℃ 、5 % CO2條件培養(yǎng)。其他步驟同上。