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銷售商: 武漢英科生物技術有限公司 | 查看該公司所有產品 >> |
乳腺上皮細胞完全培養基是一種促進人乳腺原代上皮細胞體外生長的培養基。該產品是一種無菌的液體混合系統,含有維持目的細胞生長所必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物以及生長因子等。培養基基于碳酸氫鹽的緩沖體系,在5% CO2/95%空氣的培養箱中平衡時,pH值為7.4。該培養基的配方可以提供一個合適的營養環境,選擇性地促進體外人乳腺原代上皮細胞的生長和擴增。
4℃避光保存1個月內有效。
1.乳腺癌原代細胞培養
采用預冷的DMEM/F-12培養基將細胞外基質膠(Corning#356231)按1:50比例稀釋,至少提前30 min將稀釋后的基質膠預鋪在培養瓶/板底部表面,并使其完全覆蓋底部表面,30~60 min后吸干備用。將分離并計數后的細胞懸液接種于培養瓶/板,補加完全培養基至所需體積,輕輕搖晃混勻,表面消毒后置于培養箱,37 ℃ 、5 % CO2條件下進行培養;原代細胞初次接種后2-3 天內勿動(利于細胞貼壁)。
2.原代乳腺上皮細胞傳代
鏡下觀察細胞形成克隆,且匯合度達80~90%時即可傳代。培養箱中取出細胞,棄去舊培養液,加入適量TrypLE™ Express酶(Gibco#12605010)37℃孵育,10~20 min后取出,輕拍培養瓶/板側面,顯微鏡下觀察細胞消化情況。細胞消化至細胞變圓并開始脫落時用含10%胎牛血清的DMEM培養基終止消化,并將細胞轉移至離心管中,室溫,300 g,離心5 min;棄上清,以1-2 mL完全培養基重懸細胞,活細胞計數,將細胞懸液按適合的細胞密度接種于預鋪有基質膠的培養瓶/板底部,預鋪方法同步驟1。補加完全培養基至所需體積,輕輕搖晃混勻,表面消毒后置于培養箱,37 ℃ 、5 % CO2條件下繼續培養。