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銷售商: 武漢英科生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
本產(chǎn)品包含各種酶法組織消化中常用的膠原酶等蛋白酶,能特異性地降解胞外膠原蛋白,使膠原蛋白和纖維粘連蛋白的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)解離,而不損壞細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)的完整性。使用本產(chǎn)品進(jìn)行組織消化可以使組織中細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使組織由塊狀變成絮狀,經(jīng)過機(jī)械吹打后制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液。制備的細(xì)胞懸液可用于原代培養(yǎng)、流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)(如凋亡、增殖、細(xì)胞周期等)研究。適用范圍:各種正常和腫瘤組織,從中分離得到原代細(xì)胞,包括上皮細(xì)胞,間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞等。
-20℃避光保存6個月內(nèi)有效。
(1)提前將消化酶從-20℃冰箱取出置于2-8℃融化;
(2)使用消化酶稀釋液(貨號:PRS-TDD-2)按照1:1比例稀釋組織消化酶,配制成工作濃度;
(3)將組織轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中,加入3 mL組織清洗液(貨號:PRS-TCR-1)沖洗組織,反復(fù)2-3次;
(4)在無菌條件下將組織機(jī)械切割成1~2 mm3大小之后轉(zhuǎn)移至15 mL無菌離心管中;
(5)加入5 mL組織清洗液,1500 rpm 常溫離心3 min;
(6)棄上清,加入12mL工作濃度的消化酶,標(biāo)記樣本名稱及編號并封口,放入恒溫振蕩培養(yǎng)箱中消化,設(shè)置參數(shù)37 ℃、200~300 rpm(根據(jù)樣本質(zhì)地設(shè)置轉(zhuǎn)速),待組織消化呈團(tuán)絮狀,沒有明顯肉眼可見硬塊終止消化;
(7)取出消化好的樣本,1500 rpm 常溫離心3 min。
(8)棄上清后,加入6mL含血清培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化,1500 rpm 常溫離心3 min。
(9)棄上清后加入稀釋液待用。
注意事項
1. 本產(chǎn)品在使用前需在2-8℃溶化后使用,融化后需在一周內(nèi)使用完畢。
2. 使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
3. 本產(chǎn)品儲存濃度為工作濃度的2倍,使用前需要用稀釋液按照1:1稀釋。
4. 為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,一般在37℃條件下使用,根據(jù)具體實驗情況也可在2-8℃條件下使用。
5. 請于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品,超出保質(zhì)期后,將無法達(dá)到理想的使用效果。
6. 本產(chǎn)品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。