本產品包含各種常用的蛋白酶,能特異性地降解胞外膠原蛋白,使膠原蛋白和纖維粘連蛋白的網狀結構解離,而不損壞細胞表面結構的完整性。使用本產品進行類器官消化可以使類器官細胞間的橋連結構松動,使類器官變得松散,經過機械吹打后制成細胞群團懸液。制備的細胞懸液可用于類器官擴大培養、流式細胞儀進行細胞生物學(如凋亡、增殖、細胞周期等)研究。適用范圍:各種類型的類器官。
2-8℃避光保存1個月內有效;-20℃避光保存6個月內有效。
(1)去除類器官培養板中的培養基,加入1 mL預冷PBS吹打基質膠,反復3-5次;
(2)將懸液轉移至15 mL離心管中,1500 rpm 常溫離心5 min;
(3)小心吸去上清和基質膠層,可重復加入預冷PBS吹打,離心,最大程度去除基質膠。
(4)棄上清,加入5-10 mL解離試劑,封口后放入恒溫振蕩培養箱中消化,設置溫度37 ℃、轉速200~300 rpm(根據類器官大小設置轉速),注意鏡下檢查類器官消化情況,類器官消化成多細胞團塊為宜;
(5)取出消化好的樣本,1500 rpm 常溫離心3 min。
(6)棄上清后,加入6 mL含血清培養基進行終止消化,1500 rpm 室溫離心3 min。
(7)棄上清后加入稀釋液待用。
注意事項
1. 使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
2. 為保持本產品的最佳使用效果,一般在37℃條件下使用,根據具體實驗情況也可在 2-8℃條件下使用。
3. 請于保質期內使用本產品,超出保質期后,將無法達到理想的使用效果。
4. 本產品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。