人胚胎祖細胞株SK17克隆來源于已注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09) (West et al,2008)。它表達肌肉祖細胞的標識基因,如轉錄因子肌分化-1(M-YOD1)和肌細胞生成素(MYOG),胚胎肌球蛋白重聯3(MYH3)(Karsch-Mizrac-hi,I.,et,al,1989),肌動蛋白ACTC1和ACTA1,肌管M鈣粘蛋白(CDH15)。它的遠端HOX基因表達的是HOXA9,B8,C9。在分化培養基ES-K140分化下,這株細胞表達近腎小球細胞標識,包括腎素蛋白酶(REN)的轉錄,此激活血管緊張素原生成血管緊張素1(Fuchs et al, 2002), 還相對高的平滑肌標識肌球蛋白重鏈11(MYH11)和肌動蛋白A2(ACTA2).
陽性mRNA標記:MYOD1, MYOG, MYH3, ACTC1,ACTA1, CDH15
產品信息
來源:人胚胎祖細胞株SK17克隆來源于已在NIH注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09)(West, M.D.et al,2008)
應用范圍:骨骼肌
細胞數:每管含有>500,000細胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長培養基:ES-M150
推薦培養環境:細胞應培養在有0.1%明膠涂層的組織培養級別的聚苯乙烯的培養皿上。快速融解,隨后用培養基緩慢稀釋,細胞最初的接種密度應該是大約20,000細胞/cm2。 細胞應培養在37℃的5%CO2和5%O2可增濕培養箱中,培養基每周至少更換兩次。對常規的培養,在細胞長匯合后,按1:3的比例進行傳代。
注意:生長匯合后超過兩天,不傳代將會導致細胞的終末分化。
可用分化培養基:
分化培養基: Cat No. ES-K140
細胞群體倍增時間:大約50個小時
細胞群體倍增:細胞株SK17在12代出售(最初從長匯合1.9cm2細胞培養皿中分離出的克隆設為P1),以1.9cm2細胞培養皿記,其對應大約15倍增,以原始的培養記,其對應大約31.5倍增。在體外,這株細胞有有限的細胞周期,在大約70個細胞群體倍增時停止生長。在正確的使用情況下,這株細胞可以擴增至少10個群體倍增。
質量控制:
無菌試驗:HIV(1,2)、HBV、HCV、EBV、細菌、支原體和真菌檢測為陰性。
冷凍復蘇測試結果:>50% 細胞活性,>25%的附著性,具有生長匯合性,保持原始的細胞形態。
分析證明:請詢要
使用限制:這些細胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商業的目的使用。獲得該細胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術支持:請聯系上海健耕醫藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
Fuchs, S., Germain, S., Philippe, J., Corvol, P. and Pinet, F. 2002. Expression of Renin in Large Arteries Outside the Kidney Revealed by Human Renin Promoter/LacZ Transgenic Mouse. Am. J. Pathol. 161(2) 717-725.
Karsch-Mizrachi, I., Travis, M., Blau, H. & Leinwand, L.A. Expression and DNA sequence analysis of a human embryonic skeletal muscle myosin heavy chain gene. Nucleic Acids Res 17, 6167-6179 (1989).
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
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