人胚胎祖細胞株U31克隆來源于已注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09) (West et al, 2008)。它表達多巴胺代謝和急交感神經嵴的標識,包括神經營養素受體NTRK,酪氨酸羥化酶TH,細胞視黃酸結合蛋白-1(CRABP)1,KIT。并且沒有HOX基因的表達,在分化試劑ES-K43作用下,這株細胞表達腦膜通道SLC13A4,神經遞質轉運子SLC6A1和SLC6A12,因此它可以用在研究血腦屏障和新藥開發中(Thoeringer et al, 2009), 同時高水平表達蛋白磷酸酶1調節亞基1B(PPP1R1B),一個多巴胺受體的下游靶點。在有地塞米松的條件下分化,這株細胞表達苯基乙醇胺N-甲基轉移酶PNMT,腎上腺素合成的最后一步。
陽性mRNA標記:NTRK,TH,CRABP1,KIT,DARPP32,SLC13A4,PNMT
產品信息
來源: 人胚胎祖細胞株SM30克隆來源于已在NIH注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09)(West, M.D.et al,2008)
應用范圍:神經組織,藥物開發,血腦屏障
細胞數:每管含有>500,000細胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長培養基:ES-NC100
推薦培養環境:細胞應培養在有0.1%明膠涂層的組織培養級別的聚苯乙烯的培養皿上。快速融解,隨后用培養基緩慢稀釋,細胞最初的接種密度應該是大約20,000細胞/cm2。細胞應培養在37℃的5%CO2和5%O2可增濕培養箱中,培養基每周至少更換兩次。對常規的培養,在細胞長匯合后,按1:3的比例進行傳代。
注意:生長匯合后超過兩天,不傳代將會導致細胞的終末分化。
可用分化培養基:
分化培養基: Cat No. ES-K43
細胞群體倍增時間:大約50個小時
細胞群體倍增:細胞株U31在13代出售(最初從長匯合1.9cm2細胞培養皿中分離出的克隆設為P1),以1.9cm2細胞培養皿記,其對應大約16.5倍增,以原始的培養記,其對應大約33倍增。在體外,這株細胞有有限的細胞周期,在大約70個細胞群體倍增時停止生長。在正確的使用情況下, 這株細胞可以擴增至少10個群體倍增。
質量控制:
無菌試驗:細菌,真菌陰性,
冷凍復蘇測試結果:>50% 細胞活性,>25%的附著性,具有生長匯合性,保持原始的細胞形態。
分析證明:請詢要
使用限制:這些細胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商業的目的使用。獲得該細胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術支持:請聯系上海健耕醫藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
Thoeringer CK, Ripke S, Unschuld PG, Lucae S, Ising M, Bettecken T, Uhr M, Keck ME, Mueller-Myhsok B, Holsboer F, Binder EB, Erhardt A. 2009. The GABA transporter 1 (SLC6A1): a novel candidate gene for anxiety disorders. J Neural Transm. Jun;116(6):649-57. Epub 2008 Jul 8.
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
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