人胚胎祖細胞株W10克隆來源于已注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09) (West et al, 2008)。它表達心臟神經嵴衍生表達蛋白2(HAND2),其是神經嵴和特定中胚層系(如下肢和間充質)(Ruest,et al,2003)的標識物,其遠端HOX基因表達的是HOXA4,B7。在分化試劑ES-K50分化下,這株細胞在脈絡叢中表達通道SLC7A10,因此它可以用在研究血腦屏障中。在分化試劑ES-K160分化下,它向上調控單羧酸轉運子SLC16A9,因此可以用在藥物篩選中。在分化試劑ES-K45分化下,這株細胞高水平表達平滑肌標識, 包括MYH11和ACTA2.
陽性mRNA標記:HAND2,COL4A6
產品信息
來源: 人胚胎祖細胞株SM30克隆來源于已在NIH注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09)(West,M.D.et al,2008)
應用范圍:藥物篩選,肌肉,血腦屏障
細胞數:每管含有>500,000細胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長培養基:ES-NC180
推薦培養環境:細胞應培養在有0.1%明膠涂層的組織培養級別的聚苯乙烯的培養皿上。快速融解,隨后用培養基緩慢稀釋,細胞最初的接種密度應該是大約20,000細胞/cm2。細胞應培養在37℃的5%CO2和5%O2可增濕培養箱中,培養基每周至少更換兩次。對常規的培養,在細胞長匯合后,按1:3的比例進行傳代。
注意:生長匯合后超過兩天,不傳代將會導致細胞的終末分化。
可用分化培養基:
分化培養基: Cat No. ES-K45,ES-K50,ES-160
細胞群體倍增時間:大約50個小時
細胞群體倍增:細胞株W10在12代出售(最初從長匯合1.9cm2細胞培養皿中分離出的克隆設為P1),以1.9cm2細胞培養皿記,其對應大約15倍增,以原始的培養記,其對應大約31.5倍增。 在體外,這株細胞有有限的細胞周期,在大約70個細胞群體倍增時停止生長。 在正確的使用情況下,這株細胞可以擴增至少10個群體倍增。
質量控制:
無菌試驗:HIV(1,2)、HBV、HCV、EBV、細菌、支原體和真菌檢測為陰性。
冷凍復蘇測試結果:>50% 細胞活性,>25%的附著性,具有生長匯合性,保持原始的細胞形態。
分析證明:請詢要
使用限制:這些細胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商業的目的使用。獲得該細胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術支持:請聯系上海健耕醫藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
Helboe L, Egebjerg J, Møller M, Thomsen C. 2003. Distribution and pharmacology of alanine-serine-cysteine transporter 1 (asc-1) in rodent brain. Eur J Neurosci. Oct;18(8):2227-38.
Ruest LB, Dager M, Yanagisawa H, Charité J, Hammer RE, Olson EN, Yanagisawa M, and Clouthier DE. 2003. dHAND-Cre transgenic mice reveal specific potential functions of dHAND during craniofacial development. Dev. Biol. 257(2):263-277.
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
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