人胚胎祖細胞株EN27克隆來源于已注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09)(West et al, 2008)。它表達抑半胱氨酸蛋白酶蛋SN (CST1), 殺傷細胞凝集素樣受體C亞家族成員2(KLRC2),KLRC3, cGMP 特異性的磷酸二酯酶5A(PDE5A),神經元細胞粘附因子(NRCAM),叉頭框G1(FOXG1),和GATA結合蛋白3(GATA3)。這株細胞不表達HOX同源基因。在分化試劑ES-K250分化下,這株細胞表達向上調控MYH11和速激肽3(神經介素和神經介素beta)(TAC3)。
陽性mRNA標記:CST1, KLRC2, KLRC3, PDE5A, NRCAM, FOXG1, GATA3
產品信息
來源: 人胚胎祖細胞株EN27克隆來源于已在NIH注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09)(West,M.D.et al,2008)
應用范圍:肌肉
細胞數:每管含有>500,000細胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長培養基:ES-M260
推薦培養環境:細胞應培養在有0.1%明膠涂層的組織培養級別的聚苯乙烯的培養皿上。快速融解,隨后用培養基緩慢稀釋,細胞最初的接種密度應該是大約20,000細胞/cm2。細胞應培養在37℃的5%CO2和5%O2可增濕培養箱中,培養基每周至少更換兩次。對常規的培養,在細胞長匯合后,按1:3的比例進行傳代。
注意:生長匯合后超過兩天,不傳代將會導致細胞的終末分化。
可用分化培養基:
分化培養基:ES-K250
細胞群體倍增時間:大約50個小時
細胞群體倍增:細胞株EN27在12代出售(最初從長匯合1.9cm2細胞培養皿中分離出的克隆設為P1),以1.9cm2細胞培養皿記,其對應大約13.5倍增,以原始的培養記,其對應大約31.5倍增。在體外,這株細胞有有限的細胞周期,在大約70個細胞群體倍增時停止生長。在正確的使用情況下,這株細胞可以擴增至少10個群體倍增。
質量控制:
無菌試驗:細菌,真菌陰性,
冷凍復蘇測試結果:>50% 細胞活性,>25%的附著性,具有生長匯合性,保持原始的細胞形態。
分析證明:請詢要
使用限制:這些細胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商業的目的使用。獲得該細胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術支持:請聯系上海健耕醫藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
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