人胚胎祖細(xì)胞株EN55克隆來(lái)源于已注冊(cè)的親代人胚胎干細(xì)胞系H9(WA09)(West et al, 2008)。它表達(dá)基因GATA2,類整合素金屬蛋白酶凝血酶敏感素序列-2(ADAMTSL2), FGF14, 血管生成素2(ANGPT2), 和T-box 1(TBX1)。這株細(xì)胞不表達(dá)HOX同源基因。在分化試劑ES-K49分化下,這株細(xì)胞向上調(diào)控CYP26A1的表達(dá)(其參與RA類物質(zhì)的羥基化反應(yīng),包括4-OH-RA, 4-oxo-RA和18-OH-RA),同時(shí)也向上調(diào)控SCUBE2的表達(dá),其參與Sonic Hedgehog(SHH)和SHH受體PTCH1(Patched-1)作用,從而增強(qiáng)SHH信號(hào)系統(tǒng)的活性(Tsai et al,2009)。
陽(yáng)性mRNA標(biāo)記:GATA2,ADAMTSL2, FGF14, ANGPT2,TBX1
產(chǎn)品信息
來(lái)源: 人胚胎祖細(xì)胞株EN55克隆來(lái)源于已在NIH注冊(cè)的親代人胚胎干細(xì)胞系H9(WA09)(West,M.D.et al,2008)
應(yīng)用范圍:干細(xì)胞科研,
細(xì)胞數(shù):每管含有>500,000細(xì)胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長(zhǎng)培養(yǎng)基:ES-M15
推薦培養(yǎng)環(huán)境:細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)在有0.1%明膠涂層的組織培養(yǎng)級(jí)別的聚苯乙烯的培養(yǎng)皿上。快速融解,隨后用培養(yǎng)基緩慢稀釋,細(xì)胞最初的接種密度應(yīng)該是大約20,000細(xì)胞/cm2。細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)在37℃的5%COf和5%O2可增濕培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)基每周至少更換兩次。對(duì)常規(guī)的培養(yǎng),在細(xì)胞長(zhǎng)匯合后,按1:3的比例進(jìn)行傳代。
注意:生長(zhǎng)匯合后超過(guò)兩天,不傳代將會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的終末分化。
可用分化培養(yǎng)基:
分化培養(yǎng)基:ES-K21
細(xì)胞群體倍增時(shí)間:大約50個(gè)小時(shí)
細(xì)胞群體倍增:細(xì)胞株EN55在12代出售(最初從長(zhǎng)匯合1.9cm2細(xì)胞培養(yǎng)皿中分離出的克隆設(shè)為P1),以1.9cm2細(xì)胞培養(yǎng)皿記,其對(duì)應(yīng)大約13.5倍增,以原始的培養(yǎng)記,其對(duì)應(yīng)大約31.5倍增。在體外,這株細(xì)胞有有限的細(xì)胞周期,在大約70個(gè)細(xì)胞群體倍增時(shí)停止生長(zhǎng)。在正確的使用情況下,這株細(xì)胞可以擴(kuò)增至少10個(gè)群體倍增。
質(zhì)量控制:
無(wú)菌試驗(yàn):細(xì)菌,真菌陰性,
冷凍復(fù)蘇測(cè)試結(jié)果:>50% 細(xì)胞活性,>25%的附著性,具有生長(zhǎng)匯合性,保持原始的細(xì)胞形態(tài)。
分析證明:請(qǐng)?jiān)円?/div>
使用限制:這些細(xì)胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商業(yè)的目的使用。獲得該細(xì)胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術(shù)支持:請(qǐng)聯(lián)系上海健耕醫(yī)藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
Tsai MT, Cheng CJ, Lin YC, Chen CC, Wu AR, Wu MT, Hsu CC, Yang RB. 2009. Isolation and characterization of a secreted, cell-surface glycoprotein SCUBE2 from humans. Biochem J. 29;422(1):119-28.
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
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遠(yuǎn)景,使命, 價(jià)值觀
健耕醫(yī)藥專注于干細(xì)胞事業(yè), 為干細(xì)胞領(lǐng)域的科研和臨床專家提供全面的解決方案。“合作共贏,創(chuàng)造價(jià)值,學(xué)習(xí)改進(jìn)”是我們的價(jià)值觀,我們將努力成為干細(xì)胞領(lǐng)域最卓越產(chǎn)品,技術(shù)及服務(wù)的供應(yīng)商,以服務(wù)于中國(guó)組織工程再生醫(yī)藥科學(xué),從而服務(wù)于社會(huì)。
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