人胚胎祖細胞株RAD20.16克隆來源于已注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09)(West et al, 2008)。它表達γ-氨酪酸B受體2(GABBR2),FOXA1, CDH10,SLIT和類NTRK家族成員1(SLITRK1),間皮素(MSLN),和鉀中間/小傳導(dǎo)鈣激活通道亞家族N成員2(KCNN2)。這株細胞最遠端HOX同源基因是HOXA11,B9和C8。在分化試劑ES-K65分化下,這株細胞向上調(diào)控ROS1和CNTN1。
陽性mRNA標記:GABBR2,FOXA1,CDH10,SLITRK1,MSLN, KCNN2
產(chǎn)品信息
來源: 人胚胎祖細胞株RAD20.16克隆來源于已在NIH注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09)(West,M.D.et al,2008)
應(yīng)用范圍:干細胞科研,
細胞數(shù):每管含有>500,000細胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長培養(yǎng)基:ES-E10
推薦培養(yǎng)環(huán)境:細胞應(yīng)培養(yǎng)在有0.1%明膠涂層的組織培養(yǎng)級別的聚苯乙烯的培養(yǎng)皿上。快速融解,隨后用培養(yǎng)基緩慢稀釋,細胞最初的接種密度應(yīng)該是大約20,000細胞/cm2。細胞應(yīng)培養(yǎng)在37℃的5%CO2和5%O2可增濕培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)基每周至少更換兩次。對常規(guī)的培養(yǎng),在細胞長匯合后,按1:3的比例進行傳代。
注意:生長匯合后超過兩天,不傳代將會導(dǎo)致細胞的終末分化。
可用分化培養(yǎng)基:
分化培養(yǎng)基:ES-K65
細胞群體倍增時間:大約50個小時
細胞群體倍增:細胞株RAD20.16在10代出售(最初從長匯合1.9cm2細胞培養(yǎng)皿中分離出的克隆設(shè)為P1),以1.9cm2細胞培養(yǎng)皿記,其對應(yīng)大約13.5倍增,以原始的培養(yǎng)記,其對應(yīng)大約31.5倍增。在體外,這株細胞有有限的細胞周期,在大約70個細胞群體倍增時停止生長。在正確的使用情況下,這株細胞可以擴增至少10個群體倍增。
質(zhì)量控制:
無菌試驗:細菌,真菌陰性,
冷凍復(fù)蘇測試結(jié)果:>50% 細胞活性,>25%的附著性,具有生長匯合性,保持原始的細胞形態(tài)。
分析證明:請詢要
使用限制:這些細胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商業(yè)的目的使用。獲得該細胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術(shù)支持:請聯(lián)系上海健耕醫(yī)藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
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