人胚胎祖細胞株RAPEND18克隆來源于已注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09)(West et al,2008)。它表達P450酶CYP3A7 (它可以氧化多種結構上不相關的化合物,包括類固醇,脂肪酸,外源性化學物質,因而可以用在藥物篩選上), TSHZ2, LEMD1(表達在睪丸和結腸癌上的基因(Yuki et al, 2004)), SLC8A3 (一個在興奮收縮偶聯中快速運輸Ca2+的通道), CD52和HAND2。這株細胞最遠端HOX同源基因是HOXA11,B8和C9。在分化試劑ES-K240分化下, 這株細胞向上調控LAMA3, APCDD1,SLC22A3(一種在肝,腎,小腸中的多專一性的有機陽離子轉運因子),催乳激素(PRL),Persephin(PSPN)(在培養中其能促進中腦腹側多巴胺能神經元的存活,體內在6- 羥多巴胺治療后可以防止中腦腹側多巴胺能神經元的降解),NPNT。
陽性mRNA標記:CYP3A7, TSHZ2, LEMD1, SLC8A3, CD52, HAND2
產品信息
來源: 人胚胎祖細胞株RAPEND18克隆來源于已在NIH注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09)(West,M.D.et al,2008)
應用范圍:神經
細胞數:每管含有>500,000細胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長培養基:ES-M45
推薦培養環境:細胞應培養在有0.1%明膠涂層的組織培養級別的聚苯乙烯的培養皿上。快速融解,隨后用培養基緩慢稀釋,細胞最初的接種密度應該是大約20,000細胞/cm2。細胞應培養在37℃的5%CO2和5%O2可增濕培養箱中,培養基每周至少更換兩次。對常規的培養,在細胞長匯合后,按1:3的比例進行傳代。
注意:生長匯合后超過兩天,不傳代將會導致細胞的終末分化。
可用分化培養基:
分化培養基:ES-K240
細胞群體倍增時間:大約50個小時
細胞群體倍增:細胞株RAPEND18在13代出售(最初從長匯合1.9cm2細胞培養皿中分離出的克隆設為P1),以1.9cm2細胞培養皿記,其對應大約13.5倍增,以原始的培養記,其對應大約31.5倍增。在體外,這株細胞有有限的細胞周期,在大約70個細胞群體倍增時停止生長。在正確的使用情況下,這株細胞可以擴增至少10個群體倍增。
質量控制:
無菌試驗:細菌,真菌陰性,
冷凍復蘇測試結果:>50% 細胞活性,>25%的附著性,具有生長匯合性,保持原始的細胞形態。
分析證明:請詢要
使用限制:這些細胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商業的目的使用。獲得該細胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術支持:請聯系上海健耕醫藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
Yuki D, Lin YM, Fujii Y, Nakamura Y, Furukawa Y. 2004. Isolation of LEM domain-containing 1, a novel testis-specific gene expressed in colorectal cancers. Oncol Rep. 12:275-80.
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
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