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摘要:TAE緩沖液主要成分是Tris-乙酸鹽與EDTA,核酸電泳緩沖液中最常用的是TAE緩沖液。配置TAE緩沖液的方法參考步驟三,室溫儲(chǔ)存TAE緩沖液出現(xiàn)晶體析出時(shí),置于37℃水浴中溶解,不影響使用。
一,50×TAE緩沖液產(chǎn)品外包裝:(如表)
貨號(hào): | T1060 |
規(guī)格: | 500ml |
保存: | 室溫儲(chǔ)存,有效期至少12個(gè)月。 |
二,TAE緩沖液使用方法:
TAE緩沖液是生物學(xué)中使用最廣泛的核酸電泳緩沖液,主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。TAE緩沖液的主要成分是Tris-乙酸鹽與EDTA,電泳時(shí)雙鏈線狀DNA的遷移率較快,電泳大于13kb的片段時(shí)分離效果好,此外,回收DNA片段時(shí)也宜用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。
本產(chǎn)品為50×濃縮液,工作濃度為1×,可直接用蒸餾水稀釋50倍后使用。若產(chǎn)品出現(xiàn)沉淀析出,請(qǐng)置于37℃水浴使其溶解,不影響使用。
組分 | 工作濃度 |
Tris-乙酸鹽 | 40mM |
EDTA | 2mM |
三,50×TAE緩沖配置方法:
組份濃度 2 M Tris-醋酸, 100 mM EDTA
配制量 1 L
配制方法:
1. 稱量下列試劑,置于1 L燒杯中。
a)Tris 242g
b)0.5 M EDTA(pH8.0) 200ml
2. 向燒杯中加入約700 ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?br />
3. 加入57.1 ml的醋酸,充分?jǐn)嚢琛?br />
4. 加去離子水將溶液定容至1 L后,室溫保存。使用時(shí)稀釋50倍成1×。
四,核酸電泳其它相關(guān)產(chǎn)品:
T1050 5×TBE 緩沖液
D1010 6×DNA Lodding Buffer
E1020 EB溶液(10mg/ml)
G8142 GoldView ‖型核酸染色劑(5000×)
五,工作液與濃縮液選擇的技巧,以及各自的優(yōu)勢(shì)。
1,工作液的優(yōu)勢(shì):工作液操作方便,降低實(shí)驗(yàn)操作步驟,對(duì)于要求無(wú)菌的實(shí)驗(yàn),降低染菌風(fēng)險(xiǎn)。
2,濃縮液的優(yōu)勢(shì):濃縮液成本相對(duì)較低,實(shí)驗(yàn)范圍更廣,對(duì)于不要求無(wú)菌的實(shí)驗(yàn),可以進(jìn)行多種濃度的實(shí)驗(yàn)分析以及比較。而且由于濃度高,保存更加穩(wěn)定。