本產(chǎn)品是StarMut Site-directed Mutagenesis Kit（Cat. No. T111-01）的升級產(chǎn)品，采用保真性能和擴增效率俱佳的StarMut XL Enzyme，能夠快速擴增15 kb以下的質(zhì)粒DNA，最大限度地降低非目的突變的發(fā)生率；其合成速度為15~30 sec/1 kb，大大縮短了反應(yīng)時間。該方法操作簡單快速，突變陽性率高，對引物設(shè)計的要求相對寬松、靈活。嚴(yán)格按說明書操作，6個以下連續(xù)堿基的突變率可達90%以上，最多可實現(xiàn)21個連續(xù)堿基的插入或刪除。通過與T4 DNA連接酶聯(lián)合使用，本試劑盒可實現(xiàn)更長片段的插入或刪除。

用途
·  15 kb以下質(zhì)粒的單個或多個鄰近堿基的置換(substitution)、缺失(deletion)、或插入(insertion)

特點
·  高效快速：采用極高保真性能和極高擴增效率的DNA聚合酶，10 kb質(zhì)粒突變反應(yīng)最多只需2.5小時
·  操作簡單：采用一步PCR法，不需要磷酸化引物，不需要連接反應(yīng)，不需要特殊菌株
·  陽性率高：6個以下連續(xù)堿基的突變率可達90%以上
·  質(zhì)控對照：提供Control Plasmid和Control Primers，通過X-gal瓊脂平板呈色變化監(jiān)控反應(yīng)各組分的性能
·  提供針對高GC模板的High-GC Additive

產(chǎn)品組分
StarMut XL Enzyme                                                       8 μl 
5 x StarMut XL Reaction Buffer                                    100 μl 
High-GC Additive^*                                                          30 μl
StarMut dNTPs                                                             25 ul
Dpn I (10 U/ml)                                                              12 μl
Control Plasmid (5 ng/ml)                                               10 μl
Control Primers (10 μM of each)                                        10 μl
ddH₂O                                                                           1 ml

保存條件
-20℃恒溫保存一年

使用方法
1． 設(shè)置PCR反應(yīng)體系：
      Template Plasmid (5~10 ng/μl)                                     1 μl 
      5 x StarMut XL Reaction Buffer                                     5 μl
      Primer Mixture (10 μM of each)                                    1 μl
      StarMut dNTPs                                                           2 μl
      ddH₂O                                                            補足至25 μl
2． 加入 0.5 μl StarMut XL Enzyme混勻，置于PCR儀中
3． 按以下設(shè)置進行PCR：
      
4． 加入1 μl Dpn I，37℃溫育≥1 hr
5． 轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)