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當(dāng)前位置 > 產(chǎn)品目錄 > 試劑 > 分子生物學(xué)試劑 > StarMut 基因定點(diǎn)突變?cè)噭┖?/div>
英文名稱:StarMut Multi Site-directed Mutagenesis Kit總訪問(wèn):468
國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口:國(guó)產(chǎn)半年訪問(wèn):13
產(chǎn)地/品牌:GenStar產(chǎn)品類別:分子生物學(xué)試劑
規(guī)       格:T114-01 最后更新:2015-8-31
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定點(diǎn)突變是一種廣泛應(yīng)用的分析蛋白和DNA的非常有力的工具。普通的定點(diǎn)突變?cè)噭┖型ǔJ腔诜聪?/SPAN>PCR技術(shù),采用高保真耐熱DNA聚合酶和互補(bǔ)的突變引物向目的基因引入單個(gè)堿基或多個(gè)鄰近堿基的突變、缺失、或插入。當(dāng)遇到多個(gè)位點(diǎn)突變的需求時(shí),利用單點(diǎn)突變?cè)噭┖兄荒軐?duì)目標(biāo)位點(diǎn)逐一引入突變,耗時(shí)費(fèi)力。


StarMut Multi Site-directed Mutagenesis MSDMKit突破了傳統(tǒng)的定點(diǎn)突變方法,只需要一步PCR反應(yīng),即可引入多個(gè)目標(biāo)突變,操作簡(jiǎn)單快捷,突變陽(yáng)性率高。該試劑盒針對(duì)單個(gè)目標(biāo)突變只采用一條磷酸化的突變引物,利用StarMut MSDM Enzyme的耐熱DNA聚合酶活性合成與模板互補(bǔ)的帶有突變的的DNA鏈,然后通過(guò)該酶的連接酶活性修復(fù)突變DNA鏈之間的缺刻(nicks),使其連接成為一條與模板互補(bǔ)的突變單鏈DNA。經(jīng)過(guò)多個(gè)PCR循環(huán)反應(yīng)后,帶有多個(gè)特定突變的DNA鏈成倍增長(zhǎng),經(jīng)過(guò)DpnI限制性內(nèi)切酶消化不含突變的質(zhì)粒模板,環(huán)化的單鏈突變DNA可直接進(jìn)行轉(zhuǎn)化,通過(guò)DNA測(cè)序或限制性內(nèi)切酶消化等方法篩選出目標(biāo)突變質(zhì)粒。本試劑盒適用于6 kb質(zhì)粒的多點(diǎn)突變,根據(jù)質(zhì)粒性質(zhì)不同,最多可引入5個(gè)獨(dú)立位點(diǎn)的突變、插入或刪除。

 

用途
·  研究突變對(duì)蛋白功能或結(jié)構(gòu)的影響
·  蛋白藥物、基因工程酶的定向進(jìn)化
 
特點(diǎn)
·  高效快速:采用一步PCR法,同時(shí)引入多個(gè)突變位點(diǎn)
·  操作簡(jiǎn)便不需要磷酸化引物,不需單獨(dú)的連接反應(yīng),不需要特殊菌株
 
產(chǎn)品組分
StarMut MSDM Enzyme                                                        8 μl
10 x StarMut MSDM Buffer                                                  100 μl
StarMut dNTPs                                                                    25 μl
Dpn I (10 U/ml)                                                                    12 μl
ddH2O                                                                                 1 ml
 
保存條件
-20恒溫保存一年
 
使用方法
1. 設(shè)置PCR反應(yīng)體系:
Template Plasmid (5~10 ng/μl)                                        1 μl
10x StarMut MSDM Buffer                                            2.5 μl
Phosphorylated primers (20 μM)                                      2 μl
StarMut dNTPs                                                              1 μl
ddH2O                                                               補(bǔ)足至25 μl
2. 加入 1 μl StarMut MSDM Enzyme混勻,置于PCR儀中
3. 按以下設(shè)置進(jìn)行PCR
4. 加入1 μl Dpn I37溫育1 hr
5. 轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)
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