GenStar HotStart Taq DNA Polymerase 是抗Taq單克隆抗體和高純度Taq DNA聚合酶的混合制品，適用于熱啟動PCR。高溫加熱前，特異地結合在Taq酶活性區的抗體有效地抑制了DNA聚合酶的活性，從而抑制低溫條件下由引物和模板DNA非特異性雜交或引物二聚體形成而導致的非特異性擴增。高溫加熱后，Taq抗體失活，暴露出Taq酶的活性區域，使之高效催化特異性結合的引物延伸，從而提高目的片段的產量，大大提高了PCR反應的靈敏度及特異性。使用本產品擴增得到的PCR產物3' 端附有一個突出的“A”堿基，可直接用于T載體克隆。

用途
·   常規PCR擴增，提高特異性
·   實時熒光定量PCR
·   多重PCR
·   TA克隆

特點
·   高特異性：抗體型熱啟動，確保高效的常溫抑制效果
·   高度靈敏：高純度的酶帶來優良的靈敏性
·   提高產量：特異性的改善可直接提高目標產物的產量
·   操作方便：室溫下配制反應體系，熱循環儀無需預熱
·  TA克隆：產物帶3' 突出A堿基，可直接進行TA克隆實驗

產品組分
HotStart Taq DNA polymerase (2.5 U/μl)              100 μl
10 x HotStart Taq Buffer                                    0.65 ml

保存條件
-20℃恒溫保存一年

活性定義
用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物，在74℃、30分鐘內，攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物所需的酶量定義為1個活性單位（U）。

質量控制
·    以λDNA為模板，可以有效擴增8 kb的DNA片段
·    以基因組DNA為模板，可以有效擴增單拷貝基因
·    55℃反應10分鐘，抗體對Taq DNA聚合酶的活性抑制效率達95%以上
·    無內切酶、外切酶污染
·    PCR檢測無殘留宿主基因組DNA
·    室溫存放一周無明顯活性降低

FAQ:
Q1: 為什么常規PCR反應體系需要在冰上配制并且容易產生非特異產物或引物二聚體?
A1: 盡管Taq DNA聚合酶的最佳活性溫度為70~75℃，該酶在37℃時已經開始有活性。因此在反應溫度升高的過程中，TaqDNA聚合酶已開始催化非特異性結合的引物延伸，從而導致非特異性擴增和引物二聚體形成。
Q2: 常用的hotstart（熱啟動）技術有哪幾種方法? 
A2: 物理阻隔、化學修飾、抗體抑制以及對酶的序列進行改造等。
Q3: 抗體型熱啟動法有哪些優勢?
A3: 抗體型熱啟動法既克服了物理阻隔法導致的因PCR前幾個循環混合不均勻而降低產量的問題，也不必像化學修飾法那樣延長初始變性時間，無需改變PCR儀的設置，使用起來非常方便。

應用實例 
 

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