B16-F10（小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞）產(chǎn)品概述：

B16-F10（小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞）操作說(shuō)明：

1)對(duì)于常溫運(yùn)輸?shù)募?xì)胞，收到細(xì)胞后，檢查是否有運(yùn)輸問題，即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損，細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運(yùn)輸問題，請(qǐng)75%酒精消毒后，保留封口膜，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù)：溫度，濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時(shí)間一般為6-12小時(shí)后，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，即可開始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系，A2780(人卵巢癌細(xì)胞)嚴(yán)格按照說(shuō)明書的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。條件允許，培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄，通過(guò)郵件發(fā)送給我們做及時(shí)狀態(tài)跟蹤。

2)對(duì)于干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞，請(qǐng)取出冷凍管后，須立即放入37C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng)，次日更換培養(yǎng)液。

B16-F10（小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞）注意事項(xiàng)：

1)細(xì)胞漂�。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。

2)對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的貼壁細(xì)胞：可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度，或隔日換液的方法來(lái)保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長(zhǎng)速度。

3)對(duì)于生長(zhǎng)不均的貼壁細(xì)胞：在培養(yǎng)過(guò)程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)（即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長(zhǎng)，而旁邊則為一塊空白），此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重新打散，貼壁，加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 

B16-F10（小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞）下面介紹幾種細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常見的污染：

一)桿菌污染：培養(yǎng)基中加入抗生素可以減少此種污染，但也不是絕對(duì)的。

二)支原體污染：傳說(shuō)中的黑焦蟲，長(zhǎng)得暴快。24小時(shí)就滿視野都是了。污染源大多數(shù)情況下是培養(yǎng)用血清。

三)念珠菌污染：似乎無(wú)處不在，而且頑固得很。長(zhǎng)得暴快(12h就能在細(xì)胞上面密布)。培養(yǎng)液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細(xì)胞上，高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。

四)霉菌污染、比較常見的一種污染，常常來(lái)源于污染的空氣、水和器械。

EC1127    RPMI 8226     人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞    人    1640    懸浮
EC547    HMrSV5     人腹膜間皮細(xì)胞    人    1640    貼壁
EC872    MEG-01     人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞    人    1640    懸浮
EC527    ECECD-18ECo     正常人結(jié)腸成纖維細(xì)胞    人    EMEM    貼壁
EC707    KGN     人卵巢顆粒細(xì)胞    人    DMEM    貼壁
EC501    HECEC70     人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞    人    DMEM    貼壁
EC497    EC3A     人永生化肝細(xì)胞    人    IMDM    貼壁
    RK13     兔腎細(xì)胞      兔    無(wú)    
EC1077    QBEC939     人膽管癌細(xì)胞    人    DMEM    貼壁
EC503    Leydig     豬睪丸間質(zhì)細(xì)胞    豬    DMEM    貼壁
EC138    BPH-1     人前列腺增生細(xì)胞    人    1640    貼壁
EC1367    WML2     小鼠肺成纖維細(xì)胞    小鼠    DMEM    貼壁
EC592    Hs 578Bst     人正常乳腺細(xì)胞    人    L15    貼壁
EC426    HECASMEC     人冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞    人    DMEM    貼壁
EC429    HSEC-3     人口腔鱗癌細(xì)胞    人    EMEM    貼壁
EC454    ECA9-22     人口腔上皮癌細(xì)胞    人    DMEM    貼壁