大量SperfusinX脂質體靜脈法siRNA動物轉染試劑盒產品說明書（中文版）

主要用途

YIJI大量SperfusinX脂質體靜脈法siRNA動物轉染試劑是一種旨在通過高效低毒的單價陽離子脂質體介導載體，能與目標siRNA形成復合物，進行體內轉染操作的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種DNA、RNA、寡聚核苷酸、核蛋白等的轉染，可以轉染各種類型的貼壁和懸浮培養細胞系（株）。尤其可用于動物體內直接轉染。產品嚴格無菌，即到即用，無核酶污染，配比優化，操作簡捷，性能穩定，轉染效率明顯。

技術背景

自1973年Greoridis最先應用脂質體包裹生物分子導入細胞后，人們開始應用脂質體將各種生物大分子導入細胞，實驗證明脂質體作為基因載體可將各種DNA轉入細菌、真菌、植物原生質和動物細胞，并可在受體細胞中表達。脂質體作為外源基因的載體，制備簡單，無免疫原性，成分無毒性；可以運載不同大小的基因；可以抵抗核酸酶的作用，延緩基因降解；可以傳輸至不同類型的細胞；脂質體膜上滲入歸巢裝置，可以增加靶向性等。SperfusinX為轉染效率更高、細胞毒性更低的新型脂質型介導載體，經包裝在任何條件下形成高效轉染復合物。穿膜效率高，轉染速度快。對細胞的負面影響最低。體外培養時，培養血清和抗菌素不影響其轉染效率；在動物實驗中成功用于體內轉染,為基因治療應用于臨床提供有利條件。

產品內容

YIJI轉染液（Reagent A）    2毫升

YIJI介導液（Reagent B）  500微升

產品說明書    1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，有效保證6月

用戶自備

實驗動物：用于基因療法的目標動物

1.5毫升離心管：用于轉染操作的容器

1毫升針筒27號針頭：用于注射的器械

實驗步驟

實驗開始前，準備好實驗所需的動物（大鼠或小鼠）。同時完成siRNA雙鏈退火復合。然后進行下列操作。

• 移取50微升YIJI介導液（Reagent B）到1.5毫升離心管
• 加入120微升YIJI轉染液（Reagent A）
• 用200微升槍頭上下抽吸混勻
• 移取10微升（總量25微克）用戶自備的siRNA樣品到另一個新的1.5毫升離心管
• 加入50微升YIJI轉染液（Reagent A）
• 用200微升槍頭上下抽吸混勻
• 即刻全部移入到含有YIJI介導液（Reagent B）的離心管里
• 用200微升槍頭上下抽吸混勻
• 置于室溫下靜置30分鐘（注意：混合液呈現混濁，但沒有沉淀）
• 使用1毫升針筒27號針頭吸入230微升上述混合液
• 即刻進行動物尾靜脈消毒
• 緩慢注射
• 16至24小時后，處死動物
• 手術移取組織、分離細胞等后續操作

注意事項

• 本產品為10次操作
• 整個操作須無菌操作
• 注意動物消毒
• 本產品可以轉染各種類型的大鼠和小鼠
• 本產品提供的成分配比優化
• siRNA用量可以使用25至100微克
• 建議轉染時間不要超過24小時
• 本公司提供系列細胞或動物轉染試劑產品

質量標準

• 本產品經鑒定性能穩定
• 本產品經鑒定轉染效率高