品系名稱：B6/JGpt-H11^{em1Cin(CAG-LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)}/Gpt

簡稱：B6-G/R

品系類型：Knock-in

品系編號：T006163

背景：C57BL/6JGpt

在生物學研究中，可以利用熒光蛋白將某些需要研究的細胞與錯綜復雜的背景區分開來。通過光學成像對它們進行觀察和定量分析，同時研究它們在時間與空間上的特性；在另一個層次上，也可以將GFP表達在特定的細胞中，來觀察這些細胞的運動和行為。

我們將綠色熒光蛋白ZsGreen與紅色熒光蛋白tdTomato相結合，同時敲入到鼠源的H11基因位點。正常情況下，小鼠全身表達ZsGreen而可激發出耀眼的綠光，可以照亮各種細胞、組織的形態和結構，因此，小鼠剛出生時候是全身泛綠，與眾不同。但我們在ZsGreen兩側埋設了loxP位點，當Cre重組酶存在時，小鼠基因組中的ZsGreen會被刪除，開啟tdTomato的表達，可發出眩目的紅光。由于Cre是可以組織特異性表達的，而小鼠跟隨Cre的表達時間和位置開啟紅光。

本模型可利用Cre/loxP位點特異性重組系統對細胞命運進行追蹤展示，揭示特定類型細胞在發育、疾病中的再生、自我更新、分化過程。雙熒光報告基因系統提供zsGreene及tdTomato兩種熒光標記，實現了重組/非重組細胞的實時檢測，因此，本模型也是一種示蹤特異性Cre表達位置的理想工具。

1.示蹤Cre的表達

2.組織、細胞標記

圖1 B6-G/R小鼠綠色熒光蛋白表達檢測。B6-G/R小鼠，取其心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎、腦、肌肉、皮膚、胰腺等組織切片后，在熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白的表達情況。

結果顯示：可觀察到B6-G/R小鼠各組織橫切面均有綠色熒光表達。

結果表明：B6-G/R小鼠主要組織能夠表達ZsGreen熒光蛋白。

2.B6-G/R小鼠表達紅色熒光蛋白檢測

圖2 B6-G/R小鼠紅色熒光表達檢測。使用B6-G/R小鼠與Cre配繁，當其后代小鼠的細胞中Cre重組酶存在時，小鼠基因組中的ZsGreen會被刪除，開啟tdTomato的表達，發紅色熒光，對照鼠為B6-G/R，發綠色熒光。 取小鼠主要組織切片后，在熒光顯微鏡下觀察紅色熒光蛋白和綠色熒光蛋白的表達情況。

結果顯示：可觀察到B6-G/R與Cre配繁產生的后代，表達Cre的組織細胞橫切面均有紅色熒光表達，而對照組只有綠色熒光蛋白的表達。

結果表明：B6-G/R小鼠與表達Cre重組酶的小鼠配繁后，能刪除FLOX區域，開啟tdTomato的表達（Cre-為B6-G/R小鼠簡寫；Cre+為B6-G/R與CAG-cre交配后代小鼠簡寫。200倍鏡下熒光圖片）。

1.Muzumdar MD; Tasic B; Miyamichi K; Li L; Luo L. 2007. A global double-fluorescent Cre reporter mouse. Genesis 45(9):593-605.