人胚胎祖細胞株4SKEL20克隆來源于已注冊的親代人胚胎干細胞系WA09 (West et al, 2008)。 它表現出血管祖細胞的標志物,如大多數遠端HOX基因表達的是HOXB7。它表現出叉頭框蛋白F1(FOXF1)陽性,這和中胚層特性一致(Peterson, R.S. et al. 1997),并表達最初的血管標志物KDR(Dumont, D.J. et al, 1995), 和血小板內皮細胞粘附分子-1(PECAM1)。
陽性mRNA標記:HOXB7,KDR, FOXF1,PECAM1,LMO2,GATA3
產品信息
來源:人胚胎祖細胞株4SKEL20克隆來源于NIH已注冊的親代人胚胎干細胞系H9 (WA09)(West,M.D.et al,2008)
應用領域:血管
細胞數:每管含有>500,000細胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長培養基:ES-M180
推薦培養環境:細胞應培養在有0.1%明膠涂層的組織培養級別的聚苯乙烯的培養皿上。快速融解,隨后用培養基緩慢稀釋,細胞最初的接種密度應該是大約20,000細胞/cm2。細胞應培養在37℃的5%CO2和5%O2可增濕培養箱中,培養基每周至少更換兩次。對常規的培養,在細胞長匯合后,按1:3的比例進行傳代。
注意:生長匯合后超過兩天,不傳代將會導致細胞的終末分化。
細胞群體倍增時間:大約50個小時
細胞群體倍增:細胞株4SKEL在11代出售 (從長匯合1.9cm2細胞培養皿中分離出的最初克隆設為P1),以1.9cm2細胞培養皿記,其對應大約14.5倍增,以原始的培養記,其對應大約31倍增。在正確的使用情況下, 這株細胞可以擴增至少10個群體倍增。
質量控制:
無菌試驗:HIV(1,2)、HBV、HCV、細菌、支原體和真菌檢測為陰性。
冷凍復蘇測試結果:>80% 細胞活性,>90%的附著性,具有生長匯合性,保持原始的細胞形態。
分析證明:請詢要
使用限制:這些細胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商業的目的使用。獲得該細胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術支持:請聯系上海健耕醫藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
Dumont, D.J., Fong, G-H., Puri, M.C., Gradwohl, G., Alitalo, K., and Breitman, M.L. 1995. Vascularization of the mouse embryo: A study of flk-1, tek, tie, and vascular endothelial growth factor expression during development. Dev. Dyn. 203:80-92.
Peterson, R.S., Lim, L., Ye, H., Zhou, H., Overdier, D.G., and Costa, R.H. 1997. The winged helix transcriptional activator HFH-8 is expressed in the mesoderm of the primitive streak stage of mouse embryos and its cellular derivatives. Mech. Dev. 69:53-69.
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
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