Cat No. ES-98
人胚胎祖細胞株E15克隆來源于已注冊的親代人胚胎干細胞系ACT03(MA03) (West et al,2008)。它表達標志物裸露角質層同源1基因(NNAT,neuronatin)( Wijnholds J.et al,1995),錨定相關蛋白-1(adherens junctions asso-ciated protein 1,AJAP1), 鈣粘蛋白CDH18,電壓門控鉀通道亞基KCNS2,神經營養因子信號傳導通路中的對接蛋白5(DOK5),在唐氏綜合征表現的轉錄因子專一同源2(SIM2)(Rachidi et al, 2005),遠端HOX基因表達HOXA2,B2。在分化試劑ES-K42分化后,這株細胞表現出很強的成軟骨標識,其包括:Ⅱ型膠原-α1(CO-L2A1),軟骨酸性蛋白-1(CRTAC1),白血球細胞衍生化學趨向素-1(LECT1),和軟骨基質-4(MATN4),然而缺少肥大軟骨細胞的標識IHH( Indian hedgehog homolog)和骨髓間充質干細胞的標識CD74。
陽性mRNA標記:NNAT, AJAP1, CDH18,KCNS2,DOK5,SIM2
產品信息
來源: 人胚胎祖細胞株E15克隆來源于親代人胚胎干細胞系ACT03(MA03)(West,M.D.et al,2008)
應用范圍:軟骨
細胞數:每管含有>500,000細胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長培養基:ES-NC002
推薦培養環境:細胞應培養在有0.1%明膠涂層的組織培養級別的聚苯乙烯的培養皿上?焖偃诮,隨后用培養基緩慢稀釋,細胞最初的接種密度應該是大約20,000細胞/cm2。細胞應培養在37℃的5%CO2和5%O2可增濕培養箱中,培養基每周至少更換兩次。對常規的培養,在細胞長匯合后,按1:3的比例進行傳代。
注意:生長匯合后超過兩天,不傳代將會導致細胞的終末分化。
可用分化培養基:
分化培養基: Cat No. ES-K42
細胞群體倍增時間:大約50個小時
細胞群體倍增:細胞株E15在13代出售(最初從長匯合1.9cm2細胞培養皿中分離出的克隆設為P1),以1.9cm2細胞培養皿記,其對應大約16.5倍增,以原始的培養記,其對應大約33倍增。在體外,這株細胞有有限的細胞周期,在大約80個細胞群體倍增時停止生長。在正確的使用情況下,這株細胞可以擴增至少10個群體倍增。
質量控制:
無菌試驗:HIV(1,2)、HBV、HCV、細菌、支原體和真菌檢測為陰性。
冷凍復蘇測試結果:>50% 細胞活性,>25%的附著性,具有生長匯合性,保持原始的細胞形態。
分析證明:請詢要
使用限制:這些細胞只能做研究使用。不能人用, 也不能以商業的目的使用。獲得該細胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術支持:請聯系上海健耕醫藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
Rachidi M, Lopes C, Charron G, Delezoide AL, Paly E, Bloch B, Delabar JM. 2005. Spatial and temporal localization during embryonic and fetal human development of the transcription factor SIM2 in brain regions altered in Down syndrome. Int J Dev Neurosci. 23(5):475-84.
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
Wijnholds J, Chowdhury K, Wehr R, Gruss P. 1995. Segment-specific expression of the neuronatin gene during early hindbrain development. Dev Biol. 171(1):73-84.
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