人胚胎祖細(xì)胞株SM30克隆來源于已注冊(cè)的親代人胚胎干細(xì)胞系H9(WA09) (West et al, 2008)。它表達(dá)成纖維細(xì)胞生長因子-18(FGF18),整聯(lián)蛋白 ITGB4基因,并且沒有HOX基因的表達(dá),在分化試劑ES-K43分化下,這株細(xì)胞呈現(xiàn)出很強(qiáng)的成軟骨特性,它高水平表達(dá)軟骨標(biāo)志,包括:Ⅱ型膠原-α1 COL2A1,白血球細(xì)胞衍生化學(xué)趨向素-1(LECT1),軟骨基質(zhì)-4(MATN4),EPYC,Ⅸ型膠原-α2(COL9A1),軟骨粘著素CHAD。這株細(xì)胞不表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)識(shí)CD74,和E15細(xì)胞株不同,它是NNAT陰性的。
陽性mRNA標(biāo)記:SOX9,NDST3,ITGB4,ZIC2
產(chǎn)品信息
來源: 人胚胎祖細(xì)胞株SM30克隆來源于已在NIH注冊(cè)的親代人胚胎干細(xì)胞系H9(WA09)(West, M.D.et al,2008)
應(yīng)用范圍:軟骨組織
細(xì)胞數(shù):每管含有>500,000細(xì)胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長培養(yǎng)基:ES-M32
推薦培養(yǎng)環(huán)境:細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)在有0.1%明膠涂層的組織培養(yǎng)級(jí)別的聚苯乙烯的培養(yǎng)皿上。快速融解,隨后用培養(yǎng)基緩慢稀釋,細(xì)胞最初的接種密度應(yīng)該是大約20,000細(xì)胞/cm2。細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)在37℃的5%CO2和5%O2可增濕培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)基每周至少更換兩次。對(duì)常規(guī)的培養(yǎng),在細(xì)胞長匯合后,按1:3的比例進(jìn)行傳代。
注意:生長匯合后超過兩天,不傳代將會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的終末分化。
可用分化培養(yǎng)基:
分化培養(yǎng)基: Cat No. ES-K43
細(xì)胞群體倍增時(shí)間:大約50個(gè)小時(shí)
細(xì)胞群體倍增:細(xì)胞株SM30在11代出售(最初從長匯合1.9cm2細(xì)胞培養(yǎng)皿中分離出的克隆設(shè)為P1),以1.9cm2細(xì)胞培養(yǎng)皿記,其對(duì)應(yīng)大約13.5倍增,以原始的培養(yǎng)記,其對(duì)應(yīng)大約30倍增。在體外,這株細(xì)胞有有限的細(xì)胞周期,在大約70個(gè)細(xì)胞群體倍增時(shí)停止生長。在正確的使用情況下,這株細(xì)胞可以擴(kuò)增至少10個(gè)群體倍增。
質(zhì)量控制:
無菌試驗(yàn):HIV(1,2)、HBV、HCV、EBV、細(xì)菌、支原體和真菌檢測(cè)為陰性。
冷凍復(fù)蘇測(cè)試結(jié)果:>50% 細(xì)胞活性,>25%的附著性,具有生長匯合性,保持原始的細(xì)胞形態(tài)。
分析證明:請(qǐng)?jiān)円?/div>
使用限制:這些細(xì)胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商業(yè)的目的使用。獲得該細(xì)胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術(shù)支持:請(qǐng)聯(lián)系上海健耕醫(yī)藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
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遠(yuǎn)景,使命, 價(jià)值觀
健耕醫(yī)藥專注于干細(xì)胞事業(yè), 為干細(xì)胞領(lǐng)域的科研和臨床專家提供全面的解決方案。“合作共贏,創(chuàng)造價(jià)值,學(xué)習(xí)改進(jìn)”是我們的價(jià)值觀,我們將努力成為干細(xì)胞領(lǐng)域最卓越產(chǎn)品,技術(shù)及服務(wù)的供應(yīng)商,以服務(wù)于中國組織工程再生醫(yī)藥科學(xué),從而服務(wù)于社會(huì)。
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