人胚胎祖細胞株4D20.8克隆來源于已注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09) (West et al, 2008)。它表達顱神經嵴間質的標識。和其他神經嵴細胞株不同的是,它高表達基因:BARX1和LHX8。BARX1調控上下顎的外胚層間充質的磨牙的排列(Mitsiadis, TA et al,1998). LHX 8 是上顎(繼發腭)和下顎間充質的標識(Zhang, Y et al,2002).在分化試劑KS-K42分化后,這株細胞在體外表現出成軟骨特性,然而,它相對缺少肥大軟骨細胞基因(骨髓間充質干細胞特性的基因標識),如COL10A1,IHH,或者間充質干細胞標識CD74.
陽性mRNA標記:BARX1,LHX8,BBOX1,FGF18,LINGO2,MSX2
產品信息
來源: 人胚胎祖細胞株4D20.8克隆來源于已在NIH注冊的親代人胚胎干細胞系H9(WA09)(West,M.D.et al,2008)
應用范圍:軟骨
細胞數:每管含有>500,000細胞, 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清(FBS)中。
推薦生長培養基:ES-N170
推薦培養環境:細胞應培養在有0.1%明膠涂層的組織培養級別的聚苯乙烯的培養皿上。快速融解,隨后用培養基緩慢稀釋,細胞最初的接種密度應該是大約20,000細胞/cm2。細胞應培養在37℃的5%CO2和5%O2可增濕培養箱中,培養基每周至少更換兩次。對常規的培養,在細胞長匯合后,按1:3的比例進行傳代。
注意:生長匯合后超過兩天,不傳代將會導致細胞的終末分化。
可用分化培養基:
分化培養基: Cat No. ES-K42
細胞群體倍增時間:大約50個小時
細胞群體倍增:細胞株4D20.8在11代出售(最初從長匯合1.9cm2細胞培養皿中分離出的克隆設為P1),以1.9cm2細胞培養皿記,其對應大約13.5倍增,以原始的培養記,其對應大約31.5倍增。在體外,這株細胞有有限的細胞周期,在大約70個細胞群體倍增時停止生長。在正確的使用情況下,這株細胞可以擴增至少10個群體倍增。
質量控制:
無菌試驗:HIV(1,2)、HBV、 HCV、 EBV、細菌、支原體和真菌檢測為陰性。
冷凍復蘇測試結果:>70% 細胞活性,>80%的附著性,具有生長匯合性,保持原始的細胞形態。
分析證明:請詢要
使用限制:這些細胞只能做研究使用。不能人用,也不能以商業的目的使用。獲得該細胞株后,用戶確保正確使用和操作。
技術支持:請聯系上海健耕醫藥有限公司(郵箱:helps@genext.com.cn 或者熱線電話:400-6988-806)。
參考:
Mitsiadis, T.A., Mucchielli, M.L., Raffo, S., Proust, J.P., Kiipman, P., and Goridis, C. 1998. Expression of the transcription factors Otlx2, Barx1 and Sox9 during mouse odontogenesis. Eur. J. Oral Sci. 106 Suppl 1:112-116.
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
Zhang, Y., Mori, T., Takaki, H., Takeuch, M., Iseki, K., Hagino, S., Murakawa, M., Yokoya, S., and Wanaka, A. 2002. Comparison of the expression patterns of two LIM-homeodomain genes, Lhx6 and L3/Lhx8, in the developing palate. Orthod. Craniofac. Res. 5:65-70.
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