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人胚胎祖細(xì)胞株EN55克隆來源于已注冊的親代人胚胎干細(xì)胞系H9（WA09）（West et al, 2008）。它表達基因GATA2，類整合素金屬蛋白酶凝血酶敏感素序列-2（ADAMTSL2）, FGF14, 血管生成素2(ANGPT2), 和T-box 1（TBX1）。這株細(xì)胞不表達HOX同源基因。在分化試劑ES-K49分化下，這株細(xì)胞向上調(diào)控CYP26A1的表達（其參與RA類物質(zhì)的羥基化反應(yīng)，包括4-OH-RA， 4-oxo-RA和18-OH-RA），同時也向上調(diào)控SCUBE2的表達，其參與Sonic Hedgehog（SHH）和SHH受體PTCH1（Patched-1）作用，從而增強SHH信號系統(tǒng)的活性（Tsai et al，2009）。
陽性mRNA標(biāo)記：GATA2，ADAMTSL2， FGF14， ANGPT2，TBX1
產(chǎn)品信息
來源： 人胚胎祖細(xì)胞株EN55克隆來源于已在NIH注冊的親代人胚胎干細(xì)胞系H9（WA09）（West，M.D.et al，2008）
應(yīng)用范圍：干細(xì)胞科研，
細(xì)胞數(shù)：每管含有>500,000細(xì)胞， 冷凍保存在1mL含10%DMSO的胎牛血清（FBS）中。
推薦生長培養(yǎng)基：ES-M15
推薦培養(yǎng)環(huán)境：細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)在有0.1%明膠涂層的組織培養(yǎng)級別的聚苯乙烯的培養(yǎng)皿上。快速融解，隨后用培養(yǎng)基緩慢稀釋，細(xì)胞最初的接種密度應(yīng)該是大約20,000細(xì)胞/cm2。細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)在37℃的5%COf和5%O2可增濕培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)基每周至少更換兩次。對常規(guī)的培養(yǎng)，在細(xì)胞長匯合后，按1:3的比例進行傳代。
注意：生長匯合后超過兩天，不傳代將會導(dǎo)致細(xì)胞的終末分化。
可用分化培養(yǎng)基：
分化培養(yǎng)基：ES-K21
細(xì)胞群體倍增時間：大約50個小時
細(xì)胞群體倍增：細(xì)胞株EN55在12代出售（最初從長匯合1.9cm2細(xì)胞培養(yǎng)皿中分離出的克隆設(shè)為P1）,以1.9cm2細(xì)胞培養(yǎng)皿記，其對應(yīng)大約13.5倍增，以原始的培養(yǎng)記，其對應(yīng)大約31.5倍增。在體外，這株細(xì)胞有有限的細(xì)胞周期，在大約70個細(xì)胞群體倍增時停止生長。在正確的使用情況下，這株細(xì)胞可以擴增至少10個群體倍增。
質(zhì)量控制：
無菌試驗：細(xì)菌,真菌陰性，
冷凍復(fù)蘇測試結(jié)果：>50% 細(xì)胞活性，>25%的附著性，具有生長匯合性，保持原始的細(xì)胞形態(tài)。
分析證明：請詢要
使用限制：這些細(xì)胞只能做研究使用。不能人用，也不能以商業(yè)的目的使用。獲得該細(xì)胞株后，用戶確保正確使用和操作。
技術(shù)支持：請聯(lián)系上海健耕醫(yī)藥有限公司（郵箱：helps@genext.com.cn 或者熱線電話：400-6988-806）。
參考：
Tsai MT, Cheng CJ, Lin YC, Chen CC, Wu AR, Wu MT, Hsu CC, Yang RB. 2009. Isolation and characterization of a secreted, cell-surface glycoprotein SCUBE2 from humans. Biochem J. 29;422(1):119-28.
West, M.D., Sargent, R.G., Long, J., Brown, C., Chu, J-S., Kessler, S., Derugin, N., Sampathkumar, J., Burrows, C., Vaziri, H., Williams, R., Chapman, K.B., Larocca, D., Loring, J.F., and Murai, J. 2008. The ACTCellerate Initiative: large-scale combinatorial cloning of novel human embryonic stem cell derivatives. Reg. Med. 3(3): 287-308.
手機版：人胚胎祖細(xì)胞株EN55
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