PEAKS® GlycanFinder 結構分辨的糖蛋白組和糖組學深度分析軟件

PEAKS
® GlycanFinder是一款具有糖結構分辨的,用于深入分析基于LC-MS/MS數據的糖蛋白質組學和糖組學的綜合性軟件。我們很高興于今天發布PEAKS
® GlycanFinder 2.5新版本。
GlycanFinder功能亮點
- 整合糖蛋白組和糖組學的解決方案-完整糖肽和游離糖的定性定量。New!
- 具備結構分辨的N糖譜和O糖譜深度表征-優化的糖組學和糖蛋白組的可信糖結構分析。New!
- 糖基化位點全面剖析-通過多酶聯合酶解實現糖基化位點的全景表征。
- 準確而靈活的發現和靶向定量方法-支持非標記和標記完整糖肽定量,新版本增加PRM靶向定量方法。New!
- 糖的從頭測序-發現新的糖。
- 儀器商中立-支持Orbitrap, timsTOF和zenoTOF數據
- 交互式可視化和報告導出-優化的圖形用戶界面(GUI),方便用戶實現一系列驗證、數據查看和導出結果的需求。
糖蛋白組的完整糖肽定性與定量
對于糖蛋白質組,PEAKS® GlycanFinder提供兩個工作流來對N糖和O糖基化肽段進行定性和定量分析。Glycan Site Profiling工作流用于分析糖基化位點,結果可匯總展示多酶切質譜數據各自鑒定到的肽段。Glycan Sample Profiling工作流用于糖蛋白、糖肽和非糖肽水平的非標記和標記定量分析。
圖1 完整糖肽分析工作流
01深入了解糖的異質性-糖鏈結構和糖基化位點剖析
為了確保糖蛋白組的更深入覆蓋,Glycan Site Profiling工作流提供了位點異質性的詳細視圖,揭示了每個糖基化位點上不同糖型的分布和豐度。通過PEAKS特有的整合多個酶切樣本的質譜數據,全面揭示每個糖基化位點的糖譜,提升可信度。
圖2. 完整蛋白覆蓋視圖和糖型比例分布圖
此外,PEAKS® GlycanFinder使用Charge Lookup策略提升糖肽定量分析的重現性,即使有些Feature存在MS2譜圖缺失,也能確保所有檢測到的糖肽Feature參與計算。

圖3. Charge Lookup
02 糖肽和糖蛋白定量
Glycan Sample Profiling工作流可以進行完整糖肽和糖蛋白的可靠鑒定和定量,支持非標記和報告離子定量方法。
>非標記定量(LFQ):基于不同樣本中肽段特征峰的相對豐度進行定量,并通過Match Between Runs對不同樣本中同一肽段的特征峰進行匹配。
圖4. Feature view of LFQ
>報告離子定量(RIQ):基于不同標簽產生的報告離子信號強度實現相對定量,支持商業化試劑iTRAQ/TMT或用戶自定義標簽。
圖5. 報告離子定量的糖肽視圖
New 基于LC-MS/MS的糖組定性與定量
通過PEAKS
® GlycanFinder新增的Released Glycan Sample Profiling工作流,用戶可輕松實現糖組學的分析。軟件內置一些常見聚糖的修飾,也支持用戶自定義,并可以進行游離糖的報告離子定量分析。
01 為糖蛋白組研究擴充糖組學數據
PEAKS® GlycanFinder支持糖基修飾和加合離子分析,以及交叉環(crossing ring)注釋,因此使得糖譜注釋和鑒定更加準確。
圖6. 含Na加合物的游離糖鑒定
圖7.帶有修飾的糖鏈鑒定
02 游離糖的報告離子定量
報告離子定量使得游離糖的定量更加準確,提升了糖定量的靈敏性和重現性,為不同樣本間糖的組成和含量變化研究提供更加可靠的數據支持。
圖7. Released Glycan的RIQ結果
New PRM靶向定量分析
PEAKS GlycanFinder 2.5的PRM 工作流可實現糖肽的靶向定量分析,根據用戶自定義的transition list,提供目標糖肽的定量結果和MS2譜圖注釋。
圖8. 糖肽靶向定量結果
New Glycan Network-破譯功能性糖基的關聯
Glycan Network展示了各種糖型之間的關聯,每條邊連接的兩個糖之間僅有一個糖單元組成不同,因此可將具有共同核心結構的、末端不同的糖全面可視化。以下圖形表明存在兩個糖合成和加工的路徑[1]。
圖9.聚糖網絡圖
GlycanFinder特有功能
糖肽上的相關聚糖被賦予s-score(%),這表明在聚糖數據庫中匹配的聚糖結構的置信度。
圖10. 鏡像圖展示排名前二的聚糖候選
當糖肽譜無法與數據庫匹配時,PEAKS® GlycanFinder將執行N-聚糖的從頭測序。這可以幫助用戶找到數據庫中沒有考慮到的其他聚糖結構。
PEAKS® GlycanFinder是一款具有糖結構分辨率的,用于深入分析的糖蛋白質組學和糖組學的綜合性軟件。PEAKS® GlycanFinder 2.5整合了完整糖肽和游離糖的分析方法,從LC-MS/MS數據中分析糖蛋白,并利用深度學習算法解決糖基化位點和聚糖結構的不確定性問題。PEAKS® GlycanFinder將peptide-based和glycan-based兩個策略結合,并整合了聚糖從頭測序技術,有助于加強N-link和O-link的定性和定量分析,從而對糖蛋白質組進行高可信度的全面分析。
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