伯樂CFX Duet熒光定量PCR儀主要功能用途
Bio-Rad CFX Duet實時熒光定量PCR是2022年5月新上市的小型經濟型雙色qPCR系統，秉承CFX Opus系統的強大溫控性能、精準光梭檢測系統，具有單重singleplex或雙重熒光定量PCR檢測(duplex assays)功能。適用于基因表達分析、基因分型(Genotyping)、靶序列定量和蛋白質熱移檢測(Protein thermal shift assays)等多樣化研究應用。主要應用包括:
1、基因表達水平定量分析
在生理、病理、環境脅迫以及SiRNA誘導基因沉默和基因敲除后動植物組織細胞及微生物特定基因表達水平的檢測。
2、基因突變的檢測
常用于SNP基因型分析(SNPgenotyping)和拷貝數變異(Copy number variation,CNV)檢測。
3、病原體檢測(Pathogen detection)
用于臨床醫學上呼吸道的感染、肺炎、消化道感染、中樞神經系統等疾病，以及畜牧業、農作物病蟲害的病原體的檢測確認、感染嚴重程度的量化評估。
4、高分辨率溶解曲線分析(High resolution melt,HRM)
高分辨熔解曲線(high-resolution melt，HRM)分析是通過實時監測升溫過程中與雙鏈DNA特異性結合的熒光染料釋放的綠色熒光強度的變化，了解 PCR產物中DNA分子的解鏈溫度情況，分析樣品特定基因片段DNA組成變化。
5、miRNA表達水平的檢測
基于miRNA與特定靶基因mRNA表達水平變化間的關聯，研究miRNA調控基因表達機制。
6、藥物研究
實時熒光定量PCR技術應用藥理作用分子機制分析、藥物作用靶點分析、耐藥基因檢測以及藥代動力學相關基因的多態性研究。
7、蛋白熱漂移實驗(Thermal shift assay,TSA)
蛋白質與配體的復合物在加熱過程會導蛋白質變性、熔解和復合物的解離，導致蛋白折疊結構中的疏水基團暴露。暴露疏水基團與測試添加的熒光染料 SYPRO Orange相結合，而提高熒光染料的發射強度。借助于實時熒光定量PCR儀的溶解曲線分析功能，通過檢測反應體系中蛋白熒光強度，生成蛋白-配體復合物的熒光-溫度曲線圖。據此。測定蛋白質在不同環境下熱變性溫度的變化，檢測小分子與目標蛋白的結合，評估候選藥物和蛋白可能的配體大規模篩選。
性能特點
伯樂CFX Duet實時熒光定量PCR儀秉承CFXOpus96qPCR系統的蜂巢式樣品模塊和樣品溫度梯度控制技術(可編程溫度梯度，可快速確定最佳退火溫度annealing temperatures)、新型推拉熱蓋和光梭式精準檢測模塊，消除了不同樣品孔熒光信號光程誤差和孔間熒光信號竄擾，無須使用ROX校正。全新CFX Maestro Software整合聯機控制和實驗數據分析功能，一鍵式數據收集、數據分析和導出。
1、雙重熒光檢測
CFX Duet實時熒光定量PCR系統，采用雙通道光學元件，并在出廠前預先針對SYBR Green等常見染料進行了校準，允許在基因分型和多基因表達分析中定量多達兩個靶標。
2、CFX Maestro軟件整合聯機控制和數據分析功能
CFX Duet通過USB 端口與計算機聯機，采用CFXMaestro軟件進行實驗設置和分析，并提供自定義報告，而無需將數據導出到其他程序。整合PrimePCR Assays，設計和驗證的PrimePCR引物;具有包括t-檢驗、方差分析在內的統計學分析模塊;
提供中文CFX Maestro Software和安全版本CFX Maestro Security Edition Software。CFX Maestro 安全版軟件提供和CFX Maestro軟件一樣的功能，提供審計和電子簽名(Audit and e-signature)安全環境，符合美國FDA21CFR Part11法規。
 

CFX Duet技術參數：

樣本槽類型：固定

樣本通量：96孔

反應體積：1–50 µL(推薦10–50 µL)

尺寸(WxDxH)：33x56x36 cm (13 x 22 x 14 in.)

重量：22 kg(48lb)

通訊：USB 2.0及以上

電子認證：IEC,CE

操作系統

激發光源：3個帶濾光片的LEDs

熒光檢測：3個帶濾光片的光敏二極管

激發光/發射光波長：450–580 nm

掃描時間

所有通道：12sec

單通道：3sec

動態范圍：10個數量級

靈敏度：1拷貝人基因組 DNA

多重檢測：每孔2靶標

96孔反應模塊

加熱和制冷技術：Peltier

熱蓋溫控范圍：30–110ºC

溫控范圍：4–100ºC

最大升降溫速率：5ºC/sec

平均升降溫速率：3.3ºC/sec

溫控準確性：±0.2ºC

溫控均一性：±0.3ºC,達到設定溫度后10s內

溫度梯度

可操作溫度范圍：30–100ºC

溫差范圍：1–24ºC

CFX Maestro數據管理和分析軟件

操作系統：Windows 10 (64-bit)

內存：最低 1 GB

數據分析模式：標準曲線絕對定量 溶解曲線分析 基因表達分析：相對定量 (∆Cq) 或均一化表達(∆∆Cq) 無限量數據文件合并分析 等位基因分析 終點法分析 數據分析選項：柱狀圖、箱線圖、點狀圖、聚類圖、散點圖和火山圖等 統計學分析：t-test 和方差分析 (ANOVA)

數據導出：鼠標右鍵菜單可保存、復制和打印所有圖表和表單 多種格式導出特定數據 可復制粘貼到 Microsoft Excel, Word和PowerPoint 等文件中 自定義輸出報告包含實驗設置、數據圖片和表格，可直接打印或保存為 PDFs 導出為RDML

格式圖片導出：以任意像素和最高 600dpi 分辨率導出圖像 圖片可保存為.bmp、.jpg或.png等格式