![]() |
超過(guò)50%的在大腸桿菌中表達(dá)的蛋白聚合成不溶性的包涵體。形成包涵體的蛋白通常是那些高度表達(dá)的蛋白。重新使它們具有生物活性結(jié)構(gòu)是低成本獲得足量樣品的一個(gè)有吸引力的方案。
|
|||||||||||||||||
[發(fā)表評(píng)論] [本類其他服務(wù)] [本類其他服務(wù)商] |
服務(wù)商: 上海萬(wàn)生昊天生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有服務(wù) >> |
超過(guò)50%的在大腸桿菌中表達(dá)的蛋白聚合成不溶性的包涵體。形成包涵體的蛋白通常是那些高度表達(dá)的蛋白。重新使它們具有生物活性結(jié)構(gòu)是低成本獲得足量樣品的一個(gè)有吸引力的方案。萬(wàn)生昊天提供恢復(fù)靶蛋白質(zhì)天然構(gòu)象的復(fù)性服務(wù)。我們先進(jìn)的方法包括應(yīng)用動(dòng)態(tài)光散射(DLS)和其他引導(dǎo)復(fù)性進(jìn)程的方法到。
標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議
雖然關(guān)于蛋白復(fù)性有一些基本的原則,但是每個(gè)蛋白的具體條件不能預(yù)測(cè)。各個(gè)蛋白的溶劑條件各不一樣,包括鹽,pH值,清潔劑和各種添加劑。動(dòng)力學(xué)過(guò)程包括折疊途徑和復(fù)性速率也是至關(guān)重要的。用盡所有的組合是既不可能也沒(méi)有必要的。甚至探索可能的組合的一小部分也是一項(xiàng)艱巨和昂貴的任務(wù)。多年來(lái),從大量的樣品測(cè)試中,我們發(fā)現(xiàn)有幾個(gè)因素,往往在復(fù)性中起到?jīng)Q定性的作用。在他們的基礎(chǔ)上,我們開(kāi)發(fā)了一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的復(fù)性協(xié)議,提供一個(gè)蛋白復(fù)性的低成本的解決方案。
對(duì)于復(fù)性項(xiàng)目,首先根據(jù)我們的包括三種復(fù)性條件的及時(shí)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議測(cè)試靶蛋白。迄今為止,我們測(cè)試的大約65%的蛋白質(zhì)是在一種條件下被復(fù)性的。復(fù)性是通過(guò)蛋白溶解度來(lái)判斷的。
定制協(xié)議
在我們的標(biāo)準(zhǔn)復(fù)性協(xié)議不能使用的情況下,我們提供定制協(xié)議,其中包括篩選多達(dá)18個(gè)復(fù)性條件。成功復(fù)性的樣品(根據(jù)溶解度判斷)會(huì)被寄給客戶進(jìn)行功能性分析。從客戶的反饋結(jié)果上擴(kuò)大復(fù)性的規(guī)模。另外,我們也可以無(wú)論何時(shí)進(jìn)行定點(diǎn)功能性檢驗(yàn)。
復(fù)性分析
溶解性是決定復(fù)性結(jié)果的最通用的方法。如果一個(gè)蛋白能在溶液中保持穩(wěn)定,復(fù)性就可被認(rèn)為是成功的。這個(gè)簡(jiǎn)單的方法有時(shí)是相當(dāng)有效的。但是也經(jīng)常被發(fā)現(xiàn)復(fù)性的溶解蛋白仍然是無(wú)生物活性的。這有可能(1)蛋白形成了可溶性的氨基酸片段或者(2)蛋白仍然是展開(kāi)/錯(cuò)誤折疊構(gòu)象,但其濃度過(guò)低以致不能高于其CMC。
如果必要,萬(wàn)生昊天將應(yīng)用DLS(動(dòng)態(tài)光散射)、尺寸排阻色譜法和圓二色性分析復(fù)性蛋白。結(jié)果將會(huì)被用于引導(dǎo)下一步的恢復(fù)靶蛋白天然構(gòu)象和生物功能的行動(dòng)。
報(bào)價(jià)
1. 對(duì)于蛋白質(zhì)復(fù)性項(xiàng)目,請(qǐng)給我們發(fā)電子郵件詢價(jià):service@wshtbio.com
2. 對(duì)于和我們簽約的蛋白表達(dá)和純化項(xiàng)目,如果蛋白在小規(guī)模測(cè)試運(yùn)行時(shí)被發(fā)現(xiàn)不溶,我們會(huì)發(fā)給您一個(gè)單獨(dú)的連同復(fù)性進(jìn)展報(bào)告的報(bào)價(jià)。