免疫共沉淀(co-immunoprecipitation，Co-IP)技術(shù)是檢測蛋白質(zhì)間相互作用的經(jīng)典方法, 其基本原理是以細(xì)胞內(nèi)源性靶蛋白為誘餌，將靶蛋白抗體與細(xì)胞總蛋白進行共孵育，促進免疫復(fù)合物的形成；隨后加入能夠與抗體Fc段結(jié)合的prorein A/G(預(yù)先結(jié)合固化在瓊脂糖小珠上)，形成“結(jié)合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗體-proteinA/G小珠”復(fù)合物，純化該復(fù)合物后凝膠電泳分離蛋白，應(yīng)用Western blot 或者質(zhì)譜技術(shù)鑒定靶蛋白的結(jié)合蛋白。

與其它研究方法相比，免疫共沉淀最大的優(yōu)勢在于該體系是在生理條件下檢測蛋白質(zhì)之間的相互作用，因此，不僅可以檢測到體內(nèi)形成的天然復(fù)合體，而且可排除過表達(dá)靶蛋白所帶來的假陽性。其次內(nèi)源性的靶蛋白質(zhì)是完全加工、修飾和成熟的蛋白質(zhì)，因此，依賴于修飾的蛋白質(zhì)相互作用也能被檢測到。

主要實驗步驟：

1、構(gòu)建表達(dá)

2、共轉(zhuǎn)細(xì)胞

3、收集并裂解細(xì)胞

4、加入蛋白A/G和抗體共同孵育

5、Westernblot檢測

服務(wù)須知：

由客戶提供已構(gòu)建好的目的基因表達(dá)質(zhì)粒和抗體，如果不能提供構(gòu)建好的表達(dá)質(zhì)粒，則提供基因序列，由我公司提供克隆技術(shù)服務(wù)，須加收克隆服務(wù)費用。

我公司有多種帶標(biāo)簽的質(zhì)粒可供選擇：myc, HA, n-flag, GFP等。

技術(shù)服務(wù)完成后向客戶提供詳細(xì)的實驗報告、測序單、質(zhì)粒和X光膠片。