菌株分離培養特性及研究結果分析！  
 

1、菌株分離培養特性和鏡檢

剖檢觀察病死羔羊肺臟組織，肉眼可見肺臟大部分呈現肉變，并伴有白色化膿灶。分離菌株在綿羊血瓊脂平板上生長為均一的灰白色、邊緣光滑、濕潤的圓形菌落，革蘭氏染色呈現陰性短小桿菌。
 
2、分離菌株生化特性

經細菌生化鑒定儀鑒定，分離株與大腸桿菌的生化反應特點一致，包括不產生氧化酶、苯丙氨酸脫氨酶、DNA酶以及硫化氫；能產生賴氨酸脫羧酶；分解乳糖，但不利用檸檬酸鹽、D-阿東醇和纖維二糖等，是大腸桿菌的可信度為99% (表 2)。在麥康凱平板上生長為紅色、濕潤圓形菌落；在伊紅美蘭平板上生長為黑色帶有金屬光澤圓形菌落；革蘭氏染色鏡檢為陰性桿菌。
 
3、分離株16S rRNA基因鑒定結果

以細菌DNA為模板，PCR擴增大腸桿菌16S rRNA基因序列，經瓊脂糖凝膠電泳檢測分離株擴增出202 bp大小的目的條帶(圖 2)。將測序序列與GenBank數據庫E. coli參考株16S rRNA基因序列進行同源性比對。結果顯示，分離株16S rRNA基因序列與E. coli參考株CP020933.1、KY906967.1、LC259015.1等相似性均為99%以上。
 
4、分離株致病性試驗結果

試驗組小鼠感染后雙目緊閉，被毛潮濕雜亂，呈腹式呼吸，瀕死小鼠表現為全身顫抖，6 h內全部死亡(100%)，而對照組小鼠無死亡。剖檢發現死亡小鼠肝臟腫大，邊緣有出血點，脾臟腫大變黑，肺臟充血及出血，局部出現壞死。無菌采集小鼠肺臟、肝臟、脾臟，均分離到與注射菌一致的大腸桿菌。
 
5、藥物敏感性試驗結果

按CLSI標準判斷分離菌株對青霉素、阿莫西林、頭孢拉定、鏈霉素、慶大霉素、多西環素、麥迪霉素、氟苯尼考、諾氟沙星、恩諾沙星、環丙沙星、復方新諾明、阿奇霉素和克林霉素等14種抗生素耐藥；對頭孢唑啉、丁胺卡那和多粘菌素B中度耐藥；對頭孢他啶、頭孢哌酮、氧氟沙星和米諾環素敏感。
 
6、ExPEC毒力因子擴增結果

以細菌DNA為模板，對9種ExPEC毒力因子進行PCR檢測，擴增到iutA (314 bp)、fyuA (787 bp)和ireA (254 bp) ，且擴增片段序列與GenBank參考序列的相似性大于99%。未檢測到papA、sfaS、focG、hlyD、afa和vaT等基因。
 
7、病理組織學觀察結果

病死羔羊肺臟支氣管管腔充血，淋巴管擴張，周圍淋巴細胞浸潤、增生，肺臟肺泡壁毛細血管充血，肺泡腔內淋巴細胞浸潤；人工感染小鼠肺臟肺泡腔內充滿滲出物，出現肺泡性肺氣腫，肺臟血管管腔充血，淋巴細胞增生，肺泡周圍炎性細胞浸潤。
 
北京百歐博偉生物技術有限公司擁有對菌種、細胞、培養基、配套試劑等產品需求者的極優質服務，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項目準確到位，都有相關人士進行維護,確保您在微生物菌種查詢網中獲得最優質服務！也正因為此，北京百歐博偉生物技術有限公司與國內外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測機構和科研院所院校、化工企業有著良好、長期和穩定的合作關系！
http://www.biobw.org/