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小鼠大隱靜脈內皮細胞的主要功能與質量檢測!
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                                    小鼠大隱靜脈內皮細胞的主要功能與質量檢測!

一、背景及概述

內皮細胞系指血管、淋巴管的內膜上皮將內腔面覆蓋的細胞。多數(shù)是單層扁平上皮屬中胎葉性的上皮。血液循環(huán)和組織中大單核的游走的吞噬細胞有人認為是來自增生的血管內皮。小鼠大隱靜脈內皮細胞分離自大隱靜脈;大隱靜脈是全身最長的淺靜脈,于足背內側緣起自足背靜脈弓,經內踝的前方至小腿內側與隱神經伴行上升,繞過股骨內側髁后方,繼續(xù)沿大腿的前內側上行,并逐漸轉向大腿的前面,達大腿根部于腹股溝韌帶下方約3~4厘米,穿卵圓窩的篩狀筋膜注入股靜脈。

大隱靜脈在注入股靜脈之前(穿卵圓窩前),還接納股內、外側淺靜脈、陰部外靜脈、旋髂淺靜脈和腹壁淺靜脈等5條較大的屬支。當大隱靜脈曲張行高位結扎術時,須將上述幾條屬支在注入部位全部結扎。此外,大隱靜脈除沿途收集小腿和大腿的淺靜脈外,還有豐富的交通支與深靜脈和小隱靜脈相交通。

小鼠大隱靜脈內皮細胞對維持大隱靜脈動態(tài)平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調節(jié)因子;大隱靜脈內皮細胞還釋放控制細胞增殖和調節(jié)血管壁緊張度的分子。小鼠大隱靜脈內皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經CD31/vWF免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

二、小鼠大隱靜脈平滑肌細胞主要功能

①血管平滑肌細胞的生長潛力是原發(fā)血管病發(fā)的重要異常因素;②參與血管壁的炎癥反應,并與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關。因此,研究大隱靜脈平滑肌細胞的代謝和信號通路是研究大隱靜脈擴張等疾病的良好實驗材料。大隱靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

三、方法簡介

實驗室分離的小鼠大隱靜脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10⁵cells/瓶。

四、質量檢測

實驗室分離的小鼠大隱靜脈平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

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