標準曲線法應用案例 (RXS-200 標樣稀釋儀)(EL系列多功能液體操作儀)
標準曲線法應用案例
簡介
標準曲線法是一種簡便、快捷的定量方法。它是將標準樣品配制成不同濃度的標準系列,在與待測組分相同的檢測條件下,等體積準確進樣,然后獲得檢測數據。一般做法為,以標準樣品的濃度為X坐標,以儀器(如:分光光度計等)的檢測數據為Y坐標,繪制標準曲線(通常為直線)。在實驗中,常用該方法進行樣品定量分析,一般要求標準曲線的擬合度R達到0.999。
RXS-200標樣稀釋儀、EL系列多功能液體操作儀-確保標準曲線的高可靠性、重復性和高精度
案例1----重金屬檢測
實驗目的:檢測樣品中的重金屬(Cu2+、Cr3+)的含量
應用行業:紡織行業等
實驗步驟:
1. 按照下表(表一、二)要求分別將300ppm的Cu2+溶液和Cr3+溶液稀釋成濃度為3ppm、15ppm、30ppm、120ppm、210ppm和30ppm的序列標準液:
表一 Cu2+溶液序列標準液
樣品杯號 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
母液 |
Cu2+溶液(300ppm) |
100ul |
500ul |
1000ul |
4000ul |
7000ul |
稀釋液 |
蒸餾水 |
9900ul |
9500ul |
9000ul |
6000ul |
3000ul |
濃度(300ppm) |
3ppm |
15ppm |
30ppm |
120ppm |
210ppm |
稀釋比 |
1% |
5% |
10% |
40% |
70% |
表二 Cr3+溶液序列標準液
樣品杯號 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
母液 |
Cr3+溶液(300ppm) |
100ul |
500ul |
1000ul |
4000ul |
7000ul |
稀釋液 |
蒸餾水 |
9900ul |
9500ul |
9000ul |
6000ul |
3000ul |
濃度(300ppm) |
3ppm |
15ppm |
30ppm |
120ppm |
210ppm |
稀釋比 |
1% |
5% |
10% |
40% |
70% |
2. 用熒光光譜儀檢測序列標準液,分別繪制Cu2+及Cr3+標準曲線;
3. 用熒光光譜儀檢測未知樣品并根據標準曲線計算樣品中Cu2+或Cr3+的濃度。
案例2------甲醛檢測
實驗目的:檢測樣品中甲醛的含量
應用行業:環保、建筑業等
實驗步驟:
1. 按照下表(表三)要求配置甲醛系列標準液;
表三 甲醛序列標準液
管號 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
標準溶液(ml) |
0 |
0.1 |
0.2 |
0.4 |
0.6 |
0.8 |
1 |
1.5 |
2 |
吸收液(ml) |
5 |
4.9 |
4.8 |
4.6 |
4.4 |
4.2 |
4 |
3.5 |
3 |
甲醛含量(ug) |
0 |
0.1 |
0.2 |
0.4 |
0.6 |
0.8 |
1 |
1.5 |
2 |
2. 添加硫酸鐵銨溶液:
向各序列標準液中添加400ul 1%硫酸鐵銨溶液,搖勻,放置15min,待測;
3. 用紫外分光光度計測定各序列標準液在波長630um的吸收值;
4. 以各序列標準液中甲醛的含量為橫坐標,吸收值為縱坐標繪制標準曲線,計算擬合曲線的R2和R值;
5. 用紫外分光光度計測定待測樣品在波長630um的吸收值;
6. 計算待測樣品的甲醛含量。
案例3------蛋白質檢測
實驗目的;檢測樣品中蛋白質的含量
應用行業:醫藥、生命科學等領域
實驗步驟:
1. 制備標準母液:
將蛋白母液(如:SP4)稀釋50倍,作為標準母液待用;
2. 制備序列標準液:
將標準母液依次稀釋至原濃度的10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%和80%,
稀釋后各序列標準液的總體積為1ml;
3. 用紫外分光光度計測試各序列標準液在波長280nm的吸收值;
4. 以序列標準液稀釋度為橫坐標,吸收值為縱坐標繪制標準曲線,計算擬合曲線R2和R的值;
5. 同樣用紫外分光光度計測試各序列標準液在波長280nm的吸收值;
6. 計算待測樣品中蛋白含量。
案例4-氨檢測
實驗目的:樣品中氨的含量
應用行業:環保、建筑行業等
實驗步驟:
1. 按照下表(表四)要求配置氨序列標準液:
表四
管號 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
標準溶液(ml) |
0 |
0.5 |
1 |
3 |
5 |
7 |
10 |
吸收液(ml) |
10 |
9.5 |
9 |
7 |
5 |
3 |
0 |
氨含量(ug) |
0 |
0.5 |
1 |
3 |
5 |
7 |
10 |
2. 在各序列標準溶液中加入500ul水楊酸溶液,100ul亞硝基鐵氰化鈉溶液和100ul次氯酸鈉溶液,混勻液體,放置室溫1h,待測;
3. 用紫外分光光度計測試各序列標準液在波長697.5nm的吸收值;
4. 以序列標準液的氨含量為橫坐標,吸收值為縱坐標繪制標準曲線,計算擬合曲線R2和R的值;
5. 用紫外分光光度計測定待測樣品在波長697.5nm的吸收值;
6. 計算待測樣品中氨含量。
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