15女上课自慰被男同桌看到了,亚洲国产精品久久久久久久,大雞巴亂倫有声小说,国产精品成人一区二区三区

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 大鼠原代細胞分離與培養

大鼠原代細胞分離與培養

瀏覽次數:4470 發布日期:2019-9-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
一、大鼠神經元細胞(酶消化法)
簡述:新生24h或E18胎鼠,取腦,剝離海馬,剪碎,木瓜酶消化,清洗過篩后鋪于多聚賴氨酸包被的培養板中。

二、大鼠雪旺細胞(植塊法)
簡述:新生24h大鼠,取坐骨神經,剝去外膜和束膜,剪成1mm3的小塊,均勻鋪于培養皿內,加少量血清,37℃ CO2培養2h后,再加入培養基,24-48h后有細胞爬出。

三、大鼠胰島(酶消化加密度梯度離心)
簡述:SD大鼠,常規麻醉、固定、消毒、進腹、膽總管插管,逆行注入預冷的1mg/ml膠原酶P溶液10ml。迅速取下胰腺,38℃水浴消化10分鐘,600μm不銹鋼網過濾,加入4℃新生牛血清和4℃Hank’s液終止消化。細胞懸液離心后,4℃ Hank’s液洗滌兩次。沉淀物加25%Ficoll混勻,其上依次分別加入23%、20%、11%Ficoll溶液和Hank’s液,離心后吸出23%-20% 及20%-11%界面的胰島,用4℃Hank’s液洗滌離心共三次。

四、大鼠心臟竇房結細胞(酶消化法)
簡述:大鼠心臟竇房結位于上腔靜脈靠近右心房處的內壁上;取出生2-3day的新生大鼠,75%酒精浸泡后,固定于解剖板上,開胸,顯微剪分離出上腔靜脈及右心房一部,至于冷的HANKS緩沖液中,于解剖鏡下觀察搏動點,并剪去多余部分;之后將幾只鼠的竇房結集中,剪碎后用0.5mg/ml II型膠原酶37℃消化20-30分鐘,期間吹打數次,可分部收集消化下來的細胞。收集到的細胞加入10倍體積的PBS,1000rpm離心5分鐘,棄上清,重復清洗一遍,沉淀中加入15%FBS的高糖DMEM培養基,重懸細胞,鋪板,37℃,5%CO2 培養90分鐘后,將未貼壁的細胞轉移至新的培養皿中,繼續培養,每天換液一次。

五、大鼠關節滑膜間質細胞(酶消化法)
簡述:大鼠麻醉后,75%酒精消毒術區,于雙側膝關節關節腔取出滑膜組織,浸泡于含1%鏈霉素和青霉素的雙抗H-DMEM中,低溫下轉移至超凈工作臺。使用含1 %雙抗的PBS沖洗滑膜組織3次,用眼科剪將其剪成約1 mm×1 mm大小的組織塊。加入10倍體積的0.4% Ⅰ型膠原酶,于37 ℃,體積分數5%CO2飽和濕度條件下進行4 h消化,待絮狀物大部分消失后,100μm細胞篩過濾,吸取濾過液,1 200 r/min離心5 min,棄上清液,無菌PBS洗滌3次,用含體積分數10%胎牛血清的H-DMEM高糖培養基(含200 mmol/L谷氨酰胺,100 μmol/L抗壞血酸,100 U/mL青霉素,100 mg/L鏈霉素),以2×106/孔的細胞濃度接種于六孔板中,置37 ℃,體積分數5%CO2培養箱中培養。

 
來源:上海鈺森生物技術有限公司
聯系電話:021-54113598 -826
E-mail:zhuangxy@fudanbio.com

標簽: 原代細胞
用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 祁门县| 六安市| 江都市| 洛川县| 依安县| 和平县| 龙游县| 遵义市| 嘉荫县| 西畴县| 山阴县| 万州区| 西青区| 马鞍山市| 上林县| 呼图壁县| 克东县| 东宁县| 汾阳市| 宜兴市| 清河县| 牙克石市| 景宁| 鄂托克旗| 西乌珠穆沁旗| 平邑县| 成武县| 垦利县| 滕州市| 垣曲县| 深泽县| 焉耆| 洪泽县| 磴口县| 望奎县| 屏东县| 门头沟区| 高台县| 雅江县| 阳东县| 克什克腾旗|