滴滴滴~BI中國市場部又來送福利啦
分析完內源和外源污染狀況
還是沒有找到原因？
那么我們繼續分析

根據魚骨圖魚刺大小所代表的問題發生概率大小，接下來我們來談談實驗操作過程中，有哪些因素會影響到我們的實驗結果呢。

操作過程

操作過程又可細分為以下幾類：

接下來我們將逐條進行分析↘

操作人員

人體皮膚表面平均帶有10³~10⁶/cm²的微生物，污染物可能由于操作人員及穿著衣物帶入。進出細胞房需穿著合適的實驗衣及更換專用的拖鞋，盡量降低粉塵、皮屑及附帶之微生物的揚起及掉落，以免造成污染。

解決方案：
人體是細菌最大的攜帶者，進出細胞房應該這么做：
1.換專用實驗衣：勤更衣，無菌無塵衣穿過六小時后，已可在每平方公分中采集到1-6個微生物。
2.戴口罩：減少講話，因為口水中含10⁷個微生物/ml，并且寄居在人體部分的支原體也會隨之影響實驗環境，所以應戴口罩操作。
3.戴手套：進入細胞房之前，應去除身上配戴所有與實驗無關的隨身物品，洗手，消毒，戴上手套，再使用75%酒精消毒。

細胞房出入口

無凈化的室內空氣可檢測到浮游菌500~2000顆/cm³。
2015藥典指導原則《9205藥品潔凈實驗室微生物監測和控制指導原則》中，有規定不同潔凈等級實驗室的浮游菌和沉降菌數量要求。

解決方案：
1.按要求細胞房應為封閉、正壓、潔凈房間（1-10萬級潔凈度）。如受限于現況，可考慮醫療用移動式空氣凈化機，以凈化空氣。
2.如擔心污染物外泄，細胞房還應設計為相對負壓。
3.人員進出細胞房應有管制，經過培訓才能進入操作，避免污染別人。
4.細胞房窗戶不建議打開！打開窗戶，許多細菌會乘機夾雜在空氣中進入細胞房里。
★細胞房內絕對不可穿拖鞋或涼鞋，以避免帶入腳氣霉菌。應該穿全包裹式鞋套或專用鞋子

生物安全柜

生物安全柜需盡量保持清潔及凈空，非必要性的物品不要放在里面，容易擾亂操作柜內氣流。使用前一定要使用消毒殺菌溶液進行擦拭[如75%酒精或Pharmacidal（不需擦拭，自然風干）]，實驗過程中，若出現液體飛濺的情況，應當馬上用消毒劑擦拭；使用后需要進行消毒并且UV處理20分鐘以上。生物安全柜與超凈工作臺的高效濾網（HEPA filter）滋生細菌后反而容易成為污染源，良好的操作環境，才能確保細胞的健康。

解決方案：
1.Biological Industries （BI）可提供：

產品名稱	貨號
支原體、細菌、真菌污染預防噴霧劑Pharmacidal	IC-110100

2.定期更換生物安全柜與超凈工作臺HEPA濾網，檢測風速與測漏。
3.開始實驗前，必須對超凈臺進行全面消毒,整個機柜表面進行擦拭，使用前先打開安全柜通風系統，流通空氣，直到原有的內部濁氣都被排出。
4.實驗過程使用明火容易導致生物安全柜氣流紊亂，非必要時應該盡量避免。

顯微鏡置物臺

顯微鏡頻繁地與不同細胞系接觸，使顯微鏡也成了污染的高發地；使用顯微鏡觀察細胞時，放置細胞培養皿或是培養瓶的載物平臺與桌面，使用前后需要進行消毒，并保持干凈，以免造成交叉污染。

解決方案：
Biological Industries （BI）可提供：

產品名稱	貨號
支原體、細菌、真菌污染預防噴霧劑Pharmacidal	IC-110100

二氧化碳培養箱

培養箱內的CO2、濕度和溫度都需要定期校準，避免對細胞提供過低或過高的二氧化碳濃度和不當的濕度與溫度；培養箱的環境非常適合微生物生長，所以水盤使用的水需滅菌并加入抑菌劑，且定期清潔擦拭培養箱體腔與不銹鋼架，杜絕微生物滋生。

解決方案： 
1.Biological Industries （BI）可提供：

產品名稱	貨號
支原體、細菌、真菌污染預防噴霧劑Pharmacidal	IC-110100
支原體預防試劑Aquaguard-1	01-867-1

2.選購可滅菌的二氧化碳培養箱，定期滅菌消毒。
3.避免將培養箱直接置于地面上，需要使用支架或置于實驗桌上。如果培養箱直接放在地面上，每次打開門時產生的空氣流動，會增加污垢、灰塵和污染物進入培養箱的機率。
4.培養箱的開門時間能短則短，開門次數越少越好，減少空氣傳播的污染物流入。
5.應避免在培養箱中有震動或是周圍有離心設備，尤其細胞剛傳代或是復蘇時，如受到震蕩搖晃會造成貼壁遲緩，甚至會有聚集成團的狀況。

水浴鍋

水浴鍋常年潮濕，是細胞房中較容易滋生細菌及真菌的設備，需要定時清潔；污染源容易在細胞復蘇、培養基或無菌試劑回溫的過程中，粘附瓶身水滴并帶入超凈工作臺中。

解決方案：
1.定期消毒更換水，水浴鍋中應使用無菌超純水，并加入抑菌劑。
Biological Industries （BI）可提供：

產品名稱	貨號
支原體預防試劑Aquaguard-2	01-916-1E

2.水浴回溫時，必須確保容器的瓶蓋不與水接觸；因為污染源可能會在此時通過瓶蓋的縫隙順勢留在瓶口。
3.水浴回溫后必須確保容器表面擦干，75%酒精消毒后再放進生物安全柜。
4.水浴鍋使用結束后，要記得將水浴鍋蓋子蓋上，避免空氣灰塵落入。

滅菌鍋

滅菌鍋及相關設備，都需要定時保養與校準以維持其正常性能，避免滅菌效果不達標。

解決方案：
定期做BD（Bowie Dick）測試，確保壓力、溫度與時間均符合滅菌要求。

離心機

離心機是細胞實驗最常使用儀器, 離心機內部的小縫隙也是藏污納垢之處，容易發生交叉污染的重災區，會發生污染的重點懷疑對象。

解決方案：
定期清潔離心機內部的轉子和腔室。
Biological Industries （BI）可提供：

產品名稱	貨號
支原體、細菌、真菌污染預防噴霧劑Pharmacidal	IC-110100

BI 中國市場部

好啦，本期介紹也就到這里啦，還沒看過癮的小伙伴記得每周關注公眾號動態噢~
 

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