腫瘤微環境(tumor microenvironment , TME),為腫瘤細胞生存場所,是一個動態復雜的網絡。實體瘤的環境中包含:腫瘤細胞、腫瘤周圍和內部聚集的大量免疫細胞、腫瘤血管、內皮細胞、成纖維細胞、細胞外基質和間質組織等,這些都是影響腫瘤轉移的關鍵因素。近幾年越來越多的研究發現,腫瘤微環境中的多細胞組成,往往會決定對某種特定療法的影響,進而決定癌癥治療的成敗。
3D培養體系已成為體外研究復雜系統(如TME)的標準,可以通過這些體系深入了解體內發生的細胞-細胞相互作用和通信。在構建體外3D共培養體系時,這些腫瘤相關細胞,常用于建立3D腫瘤球模型,將兩種或是兩種以上多細胞混合,探討不同細胞和腫瘤球的相互作用。常見3D培養模型的腫瘤細胞有:乳腺癌、胰腺癌、肺癌、肝癌、甲狀腺癌等類型的實體瘤細胞系。
傳統的3D培養系統,一般使用EHS小鼠肉瘤提取物,但由于其成分復雜(含有影響研究的生長因子或蛋白質),具有批間差,對溫度控制要求較高,可再現性差,在操作和應用上仍存在局限性。因此需要可再現的體系,可以擴展體系的復雜性,并結合多種細胞類型揭示細胞-細胞相互作用/信號傳導機制。
Vitrogel 3D水凝膠體系,為無動物源性多糖水凝膠,成分單一且明確,可再現性高,操作便捷,可在細胞培養后輕松收獲細胞,可更好模擬TME,了解如何抑制甚至逆轉侵襲性癌癥的惡性表型。
胰腺癌細胞TME實例-Vitrogel 3D 培養VitroGel 3D水凝膠體系已經用于多個細胞系的持續培養,包括最近用于胰腺癌細胞(PANC-1)的研究。美國TheWell公司近期發表了PANC-1的應用指南。結果顯示,該水凝膠體系在檢測細胞成球大小和肌動蛋白定位時,可以獲得穩定的PANC-1 3D細胞球模型。以下細胞螢光染色圖是驗證這個系統的初步實驗結果,該系統現階段可以呈指數形式擴增,并可應用于后續的分析和藥物篩選研究。
PANC-1 細胞在水凝膠中培養七天后,進行熒光染色共聚焦顯微鏡觀察(激光掃描水凝膠中細胞的 XYZ 面,影像疊加而成的腫瘤球模型)
離子成膠型水凝膠,可調節軟硬度,模仿天然細胞外基質環境,在室溫操作使用。可用于2D凝膠培養、3D培養及動物注射,為體內外研究提供共通的操作平臺。
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