支原體污染是細胞培養試驗室中最常見污染之一,保守估計常規細胞培養中有15–35%存在支原體污染。
什么是支原體?
支原體(mycoplasma)是一類沒有細胞壁、高度多形性、能通過濾菌器、可用人工培養基培養增殖的最小原核細胞型微生物,大小為0.1-0.3微米。
典型的支原體污染來源:
支原體污染可能來自培養基、血清或實驗操作者,會影響細胞生長率、細胞形態、基因表達、細胞代謝和細胞活力。支原體感染不易察覺,因此對培養細胞定期進行支原體檢測就非常重要。
– 未檢測細胞之間交叉污染
– 移液時產生的氣霧
– 不同的細胞使用同一瓶的培養基
– 已污染的物質
– 已污染的捐獻組織(<1%)
– 來自實驗者的直接污染
細胞支體污染的后果?
支原體生長緩慢,不會馬上使細胞致死, 但會影響細胞內的各種參數。
由于支原體污染會嚴重影響實驗結果的可靠性、重復性以及一致性。這是基礎研究中一個主要問題,同時也是生物產品制造中的一個主要問題。所以對支原體的常規檢測是一個 非常重要的質控標準。
現行檢測方法
Lonza MycoAlert支原體檢測試劑盒:
20分鐘 之內檢測支原體污染
來自lonza的MycoAlert支原體檢測試劑盒是檢測支原體酶活性的生化檢測方法。
支原體酶廣泛存在180多種支原體以及主要六大支原 體污染細胞培養物中,但是在真核細胞中卻沒有。因此檢測支原體酶的有無成為快速、靈敏的篩查支原體污染的標準。
搭配的Lonza Lucetta™2支原體檢測儀可以用于檢測生物發光和化學發光。
它采用特定模式進行設計,可用于Lonza的MycoAlert™支原體檢測測定,也可用于許多其他基于發光的測定,例如細胞增殖和細胞毒性測定或熒光素酶報道基因測定。
優 點:
Fast-20分鐘內即可診斷出你的培養是否健康無污染,而其它方法一般要幾個小時到數周的時間。
Convenient-只需把你的培養物與兩種試劑混合配成100ul,在Lucetta™2支原體檢測儀上讀2次數。
Universal-可以檢測所有支原體和無膽甾原體在常規細胞培養過程中的污染。
Sensitive-可檢測<50 cfu/ml的支原體,避免出現像PCR和熒光染色方法出現的陰性結果。
Complete-該支原體檢測試劑盒包含實驗所需的所有試劑,而不像商業PCR檢測方法中需要你提供PCR酶、核酸、限制性內切酶和瓊脂糖電泳所需的其它試劑。